SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3895-2014 转基因亚麻籽FP967品系实时荧光 PCR检测方法 Real-time fluorescence PCR method for detection of genetically modified ponents in triffid flax(Event FP967) 2014-01-13发布 2014-08-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T3895-2014 转基因亚麻籽FP967品系实时荧光 PCR检测方法 1范围 本标准规定了转基因亚麻籽FP967品系（又称作CDC Triffid)检测的实时荧光PCR方法. 本标准适用于转基因亚麻籽FP967品系（又称作CDC Triffid)的定性检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求 GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法 3术语、定义和缩略语 3.1术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1.1 转基因transgene 将物种本身不具有的、来源于其他物种的功能DA序列，通过各种导入手段，使其在该物种中进 行表达，以便该物种获得新的品种特征. 3.1.2 内源基因endogenous gene 在栽培的物种中拷贝数恒定的、不显示等位基因变化的基因，该基因可用于对基因组中某一目的 基因的分析. 3.2缩略语 下列缩略语适用于本文件. Ct值：C:Cycle t:threshold 每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数. DNA:deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸. dNTP:deoxyribonucleoside triphosphate 脱氧核苷三磷酸. EDTA:ethylene diaminetetraacetic acid 乙二胺四乙酸. NOST-Spec:NOS terminator and spectinomycin resistance gene NOS终止子-奇放线菌素抗性基 因.奇放线菌素抗性基因是FP967品系转基因亚麻籽独有基因，目前未在其他任何转基因作物中 使用. PCR:polymerase chain reaction 简称PCR. SAD:stearoyl-acyl carrier protein desaturase 硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶. Tris:tris(hydroxymethyl)aminomethane 三（羟甲基）氨基甲烷. 1 SN/T3895-2014 TE:Tris-HCl、EDTA缓冲液. Taq酶：DNA聚合酶. UNG酶：uracil-N-glycosylase 尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG)酶. 4主要仪器 4.1实时荧光定量PCR仪. 4.2核酸蛋白分析仪. 4.3微量进样器(0.5μL 2μL 10μL 20pL 100μL 200μL 1000μL). 4.4高速冷冻离心机. 4.5纯水器或双蒸水器. 5试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯或生化试剂. 5.1实验用水：应符合GB/T6682中一级水规格. 5.2PCR缓冲液. 5.3氯化镁(MgCl2). 5.4 dNTPs(dATP、dTTP、dCTP、dGTP...
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