SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3953-2014 国境口岸轮状病毒(A组)、诺如病毒、 星状病毒的多重RT-PCR检测方法 Detection of rotavirus(group A) norovirus and astrovirus by multiple RT-PCR at frontier port 2014-04-09发布 2014-11-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T3953-2014 国境口岸轮状病毒(A组)、诺如病毒、 星状病毒的多重RT-PCR检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸轮状病毒(A组)、诺如病毒、星状病毒多重RT-PCR检测的对象、检测方法 及结果报告. 本标准适用于国境口岸轮状病毒(A组)、诺如病毒、星状病毒的实验室检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1193基因检验实验室技术要求 SN/T1720出入境口岸轮状病毒感染监测规程 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 轮状病毒rotavirus 属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)轮状病毒属(Rotavirus) 为双链RNA病毒，基因组分l1个节段， 是引起人类、哺乳动物类和鸟类腹泻的主要病原体.轮状病毒有7个血清组(A~G) 其中A、B、C组能 引起人和动物腹泻，以A组最常见，它是婴幼儿腹泻首要的致病原. 3.2 诺如病毒Norovirus 诺瓦克样病毒Norwalk-like viruses;NLV 诺沃克样病毒Norwalk-like viruses;NLV 属于杯状病毒科(Caliciviridae)诺如病毒属(Norovirus) 为单股正链RNA病毒，是引起成人和婴 幼儿急性非细菌性胃肠炎的重要病原体，全世界范围内均有流行，全年均可发生感染.诺如病毒原称为 诺瓦克样病毒或诺沃克样病毒(Norwalk-like viruses NLV) 诺瓦克病毒(Norwalk virus NV)是这组 病毒的代表种，2002年第8届国际病毒分类委员会将其正式命名为Norovirus 我国按照音译称为诺如 病毒. 3.3 星状病毒Astrovirus 属于星状病毒科(Astroviridae)哺乳类星状病毒属(Mamastrovirus) 为单股正链RNA病毒，是引 起婴幼儿腹泻的重要病原体. 1 SN/T3953-2014 3.4 逆转录聚合酶链反应reverse transcription polymerase chain reaction;RT-PCR 将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.本标准采用一步法逆 转录聚合酶链式反应(RT-PCR).在一步法RT-PCR中，首先以RNA为模板，利用下游特异性引物， 在依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）的作用下转录合成互补DNA(cDNA) 该步称作“逆转录”；随 后，再以cDNA为模板，利用上游和下游特异性引物，在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增；最 终使RNA分子的某个特定区域（目的片段）被扩增达几百万倍. 3.5 相同标签辅助-无引物二聚体homo-tag assisted non-dimer;HAND 采用同源加尾的方式，即在上游引物和下游引物...
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