SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3961—2014 美人蕉黄斑驳病毒的检疫鉴定方法 Detection and identification of Canna yellow mottle virus 2014-04-09发布 2014-11-01实施 中华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3961-2014 美人蕉黄斑驳病毒的检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了美人蕉黄斑驳病毒检测的程序和方法. 本标准适用于进出境植物及其产品中美人蕉黄斑驳病毒的检测. 2原理 美人蕉黄斑驳病毒的基因组特征是制定本检疫鉴定方法的主要依据.美人蕉黄斑驳病毒的分类地 位、寄主范围、病害症状、分布地区、传播途径、粒体形态、基因组等参见附录A. 3仪器设备、用具及试剂 3.1仪器设备 高速冷冻离心机、电子天平(1/1000g)、实时荧光PCR、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、一20℃低温 冰箱和一80℃超低温冰箱、凝胶成像分析系统、H计、微波炉、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高压灭菌锅、 超净工作台等. 3.2用具 各种量程的可调移液器(1000gL、200μL、100μL、20AL、10L、2μL)、PCR反应管、离心管 (1.5mL)、研钵等. 3.3试剂 巢式PCR试剂见附录B 实时荧光PCR试剂见附录C 4检测与鉴定 4.1巢式PCR 具体方法见附录B. 4.2实时荧光PCR 具体方法见附录C. 5结果判定与记录 5.1结果判定 一当巢式PCR、实时荧光PCR两种检测方法的检测结果均呈阳性时,则判定为检出CaYMV. 一一当巢式PCR、实时荧光PCR两种检测方法的检测结果均呈阴性时,则判定为未检出CaYMV. 1 SN/T3961-2014 附录A (资料性附录) 美人蕉黄斑驳病毒的背景资料 A.1分类地位 中文名:美人蕉黄斑驳病毒 学名:Canna yellow mottle virus 缩写:CaYMV 分类地位:花椰菜花叶病毒科(Caulimoviridae) 杆状DNA病毒属(Badnavirus). A.2寄主范围 已报道的自然寄主为美人蕉. A.3病害症状 侵染美人蕉后可以产生多种症状,典型症状包括叶脉黄化、叶片产生褪绿斑、茎杆和花上出现条斑 (见图A.1). 图A.1 CaYMV典型症状 A.4分布地区 主要分布于日本、美国、意大利、荷兰等国家. A.5传播途径 主要通过无性繁殖材料传播.该病毒的传播介体尚未明确. 3 ...
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