SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3991-2014 赤羽病毒实时荧光RT-PCR检测方法 Detection of akabane virus with real-time RT-PCR 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 刮涂层查真伪 SN/T3991-2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国宁波出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检 疫局. 本标准主要起草人:张吉红、唐泰山、黄素文、李如松、倪健波、王建峰、张常印. I SN/T3991-2014 赤羽病毒实时荧光RT-PCR检测方法 1范围 本标准规定了赤羽病毒实时荧光RT-PCR检测方法. 本标准适用于家畜及其产品中赤羽病毒的检验. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 3术语、定义和缩略语 3.1术语和定义 下列术语和定义适应于本文件. 3.1.1 实时荧光RT-PCR real time RT-PCR 在RT-PCR反应体系中加人荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控整个RT-PCR扩增过程. 3.1.2 Ct值cycle threshold 每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数. 3.2缩略语 下列缩略语适用于本文件. AKAV:赤羽病毒(Akabane virus) DEPC:焦碳酸二乙酯(Diethypyrocarbonate) dNTP:脱氧核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate) FAM:6-羧基荧光素(6-carboxyfiuorescein) PBS:磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline) RNA:核糖核酸(Ribonucleic Acid) SDS:十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate) TAMRA:6-羧基四甲基罗丹明(6-carboxytetramethylrhodamine) Tris:三(羟甲基)氨基甲烷[tris(hydroxymethyl)aminomethane] Taq酶:Taq DNA聚合酶(Tag DNA polymerase) 4仪器和设备 4.1荧光定量PCR核酸扩增仪. 1 ...