SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3993—2014 箭毒蛙壶菌感染检疫技术规范 Quarantine protocol for infection with batrachochytrium dendrobatidis 2014-11-19发布 2015-05-01实施 防3 意 中华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 刮涂层查真伪 SN/T3993—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准非等效部分采用世界动物卫生组织(O1E)《水生动物疾病诊断手册》(2012版)第2.1.1章等 有关章节. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、中华人民共和国吉林出人境检验检 疫局. 本标准主要起草人:谢明星、彭小莉、石建平、刘棠、王群力、陈双雅、陈伟玲、许秋贝、孙福泉、 王景明. SN/T3993-2014 箭毒蛙壶菌感染检疫技术规范 1范围 本标准规定了箭毒蛙壶菌感染的临床诊断、实时荧光聚合酶链式反应检测方法. 本标准适用于箭毒蛙壶菌感染的流行病学调查、诊断、检疫和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出入境动物检疫采样 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. bp:碱基对(base pair) DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) dNTP:脱氧核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate) FAM:荧光报告基团(Carboxyfluorescein) MGB:荧光淬灭基团(Minor groove binder) Real time PCR:实时荧光聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction) Taq:水生热栖菌(Thermus aquaticu) 4仪器和试剂 4.1仪器 4.1.1冷冻离心机. 4.1.2一20℃低温冰箱. 4.1.3组织匀浆器. 4.1.4实时荧光PCR反应管. 4.1.5实时荧光PCR仪. 4.1.6高压灭菌器. 4.1.7紫外分光光度计. 4.2试剂 4.2.1水应符合GB/T6682中一级水规定. 4.2.2含有箭毒蛙壶菌的DNA或含有扩增区域序列的质粒. 4.2.3 Tag Man Fast Universal PCR Master Mix(含dNTP、Taq聚合酶和PCR反应缓冲液等). 1 ...