SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4073-2014 芒果细菌性黑斑病菌快速检测方法 Detection and identification of Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 O 国家质量监督检验检疫总局 发布 刮涂屏 SN/T4073-2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国厦门出入境检验检疫 局、福建农林大学. 本标准主要起草人:王念武、黄伙水、陈劲松、沈建国、王宏毅、翁瑞泉、黄振、胡方平. I SN/T4073-2014 芒果细菌性黑斑病菌快速检测方法 1范围 本标准规定了芒果细菌性黑斑病菌Xanthomonas cam pestris pv.mangiferaeindicae的检疫鉴定 方法. 本标准适用于进出境芒果的果实、叶片、枝条,组织繁殖材料中可能携带芒果细菌性黑斑病菌的检 疫鉴定. 2芒果细菌性黑斑病菌基本信息 学名:Xanthomonas cam pestris pv.mangiferaeindicae 分类地位:变形细菌门(Proteobacteria) Y-变形细菌纲(Gammaproteobacteria) 黄单胞菌目(Xan- thomonodales) 黄单胞菌科(Xanthomonodaceae) 黄单胞菌属(Xanthomonas)、黑腐黄单胞菌(Xan- thomonas cam pestris)、黑腐黄单胞菌芒果致病变种(Xanthomonas cam pestris pv.mangiferaeindicae) 传播途径:远距离传播主要靠带菌苗木、接穗和果实的调运. 其他信息参见附录A. 3方法原理 根据芒果细菌性黑斑病菌的致病基因hrpB特有碱基序列设计引物进行PCR扩增,并结合半选择 性培养基上的培养性状,对该菌进行检疫鉴定. 4仪器设备和主要试剂 4.1仪器设备 PCR仪、高压灭菌锅、制冰机、高速冷冻离心机、离心机、超低温冰箱、常规冰箱、旋涡震荡器、电泳 仪、凝胶成像系统、天平(感量:0.001g)、高温干燥箱、震荡培养箱、生物安全柜、可调移液枪. 4.2主要试剂 半选择性培养基NCTM3和NA培养基试剂见附录B PCR检测试剂见附录C. 5检测鉴定方法 5.1症状检查 仔细观察芒果的果实,叶片和枝条,症状描述参见附录A. 5.2检疫样品的采集及制备 取有疑似症状的芒果果实、叶片、枝条等进行实验室检测鉴定. 1 ...