SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4090-2015 食源性病原微生物实时PCR检测 通用要求 Real-time polymerase chain reaction(PCR)for the detection of food-borne pathogens-General requirements (ISO 22119:2011 Microbiology of food and animal feeding stuffs- Real-time polymerase chain reaction(PCR)for the detection of food-borne pathogens-General requirements and definitions MOD) 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 制涂查真伪 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4090-2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准修改采用ISO22119:2011《食品和动物饲料微生物学实时PCR法检测食品致病菌的通 用要求和定义》制定,与ISO22119相比,本标准做了如下修改: 一对前言进行了修改,删去了引言部分; 一对规范性引用文件的描述按照GB/T1.1的要求进行了修改; —一将标准中引用的国际标准用相应的国家标准或行业标准代替,如用SN/T2102.1代替 ISO22174; ——将标准中的3.9、3.10和3.11中的注释部分作为资料性附录分别放在了附录A、附录B和 附录C中. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国河南出入境检验检疫局. 本标准主要起草人:苗丽、李轲、杨娜、钱成、郑皓、张巨洲、张子宏、王艳、王珊. I SN/T4090—2015 食源性病原微生物实时PCR检测 通用要求 1范围 本标准规定了用聚合酶链式反应(PCR)方法从食品中检测或分离食源性病原微生物的通用要求, 也阐述了通过实时PCR扩增和检测核酸序列(DNA及RNA反转录后得到的cDNA)的要求. 本标准中的最低要求是同一实验室的样品具有可重复性,不同实验室间的试验结果具有可比较性. 本标准适用于环境样品和动物饲料中食源性病原微生物的检测. 注:由于该领域发展迅速,本标准中所举例子是标准起草阶段使用最频繁的案例. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. SN/T2102.1食源性病原体PCR检测技术规范第1部分:通用要求和定义 SN/T2102.3食源性病原体PCR检测技术规范第3部分:定性检测方法样品制备的要求 SN/T2102.4食源性病原体PCR检测技术规范第4部分:定性检测方法扩增和检测要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 实时聚合酶链式反应,即实时PCR Real-time PCR 在酶的参与下,特定的DA序列通过变性、与特定引物的退火和延伸等一系列步骤完成体外扩增 并实时监测PCR产物的过程. 注1:通常,扩增反应混合物中包含有一个或多个特异性的DNA探针.同时,这些探针结合有一种或多种荧光染 料.运用这种技术,探针与靶核酸序列特异性杂交后,激发出具有一定波长的光,从而产生荧光信号. 注2:对于用SN/T2102.4方法已经确认阳性结果的样品,可用非特异性DNA荧光染料进行检测. 3.2 PCR产...
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