SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4230-2015 副猪嗜血杆菌病检疫技术规范 Quarantine protocol for haemophilus parasuis disease 2015-05-26发布 2016-01-01实施 伪 信 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 利除居意真伪 SN/T4230-2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国重庆出入境检验检疫 局、南通大学、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所. 本标准主要起草人:仇保丰、王昱、宋鸿雁、王春来、高峰、司微、顾炳泉、高逢结、刘文斌、李应国. I SN/T4230-2015 副猪嗜血杆菌病检疫技术规范 1范围 本标准规定了副猪嗜血杆菌病的临床诊断和实验室检测方法. 本标准适用于副猪嗜血杆菌病的诊断和检疫. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T4789.28食品微生物学检验染色法、培养基和试剂 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3培养基及试剂 3.1水:符合GB/T6682中一级水的规格. 3.2无菌脱纤绵羊血. 3.3无菌犊牛血清. 3.4烟酰胺腺嘌吟二核苷酸(NAD). 3.5胰蛋白大豆琼脂(TSA):见A.1. 3.6胰蛋白大豆肉汤(TSB):见A.2. 3.7巧克力琼脂平板:见A.3. 3.8鲜血琼脂平板:见A.4. 3.9革兰氏染色液:见A.5. 3.10生化用培养基:按GB/T4789.28的规定配制. 3.11电泳级琼脂糖粉. 3.12 Tag DNA聚合酶:5U/μL. 3.13100 bp DNA ladder Marker(脱氧核糖核酸分子量标准). 3.1410倍浓度Tag DNA聚合酶缓冲液(10×Tag Buffer):含15mmol/L氯化镁. 3.15dNTP混合物:脱氧腺苷三磷酸(dATP)、脱氧胸苷三磷酸(dTTP)、脱氧鸟苷三磷酸(dGTP)、脱 氧胞苷三磷酸(dCTP)各2.5mmol/L. 3.16引物(HPS-F:5’-GTGATGAGGAAGGGTGGTGT-3’;HPS-R: 5'-GGCTTCGTCACCCTCTGT-3’). 3.1750×TAE电泳缓冲液:见A.6. 3.186×加样缓冲液:见A.7. 3.19溴化乙锭溶液:见A.8. 3.20副猪嗜血杆菌标准菌株(1~15型):由指定单位提供. 3.21金黄色葡萄球菌(ATCC25923). 3.22猪胸膜肺炎放线杆菌(ATCC27088). ...