ICS65.020.01 B15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3693-2020 百合枯萎病抗性鉴定技术规程 Technical code of practice for identification of lily resistance to fusarium wilt 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3693-2020 农业食标准 言 条平台 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口 典通 本标准起草单位：云南省农业科学院花卉研究所、国家观赏园艺工程技术研究中心、农业农村部花卉 产品质量监督检验测试中心（昆明）、云南省花卉育种重点实验室、云南省花卉工程技术研究中心、云南省 花卉标准化技术委员会、昆明市花卉遗传改良重点实验室、云南云科花卉有限公司. 本标准主要起草人：张艺萍、杨秀梅、瞿素萍、王继华、王丽花、张丽芳、苏艳、许凤、周旭红、邹凌、赵阿 香、马璐琳. I NY/T3693—2020 百合枯萎病抗性鉴定技术规程 1范围 本标准规定了百合枯萎病抗性鉴定的试剂与耗材、仪器设备、枯萎病菌接种体制备、室内抗性鉴定、病 情调查、抗病性评价和鉴定材料处理. 本标准适用于百合(Lilium spp.)种质资源对百合枯萎病抗性的室内鉴定与抗性评价. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不 小 少 兄是期引用 文件，仅注日期的版本适用于本文件. 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单适用少文件 NY/T1857.3黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程第3部分： 瓜抗枯萎病鉴定技术规程 3试剂与耗材 3.1马铃薯蔗糖培养液(PS RE 马铃薯去皮切片，标取200g:加000m蒸馏水，煮沸101nin20min 用纱布过滤，补加蒸馏水至 1000mL 加人蔗糖20g 溶化后于721C高压灭菌30mid 3.2马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA) 在制作PS培养液的基础上，加20g琼脂粉，加热溶化后于121℃高压灭菌 min. 3.31%或2%的次氯酸钠(NaC0)溶液 取1mL或2hL次氯酸钠溶液于99mL或98mL灭菌水中，摇匀. 3.4耗材 培养皿、锥形瓶、纱布、酒精灯、六盘等 4仪器设备 CENT 恒温摇床、恒温培养箱、冰箱、灭菌锅、超净工作台显微镜、移液器、血细胞计数板等. 5枯萎病菌接种体制备 5.1病原物分离 5.1.1病样采集 参照附录A 田间采集具有典型枯萎病症状的百合植株和种球样品，放入封口袋密封，登记编号后放 入4℃冰箱保存备用. 5.1.2病样处理 取病株病健组织交界部位，用解剖刀切成1cm长的茎段，或取百合带病种球，于病健组织交界部位切取 小块鳞茎(0.5cmX0.5cm) 自来水清洗干净后用75%酒精浸2s~3s 再用2%次氯酸钠溶液浸泡3min 取出用灭菌水清洗3次. 5.1.3病原分离 在超净工作台内，将消毒好的茎段或小块鳞茎接种至PSA平板培养基，每培养皿接3块~4块，写明 编号后用保鲜膜封好，放至(25士2)℃培养箱中培养5d~7d. 5.1.4分离物鉴定及纯化 分离物鉴定参见附录A.确认为尖孢镰刀菌百合专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Lilii)后，采用 单孢分离法进行分离物纯化，经科赫(Koch)法则验证后，将经过纯化的百合枯萎病致病菌接种于PSA斜 √ ...
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