ICS65.020.30 B41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7232-2020 虾肝肠胞虫病诊断规程 Code of diagnosis for Enterocytozoon hepatopenaei disease 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 SC/T7232-2020 全国农业食品标准 共服常平台 典通 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 食 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出. 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口. 本标准起草单位：天津市水生动物疫病预防控制中心、中国水产科学研究院黄海水产研究所. 本标准主要起草人：耿绪云、刘群、王菁、韩进刚、赵良炜、徐赟霞、梁艳. I SC/T7232-2020 虾肝肠胞虫病诊断规程 1范围 本标准给出了虾肝肠胞虫病(Enterocytozoon hepatopenaei disease)诊断试剂和材料、器材和设备、临 床症状，规定了采样、组织病理、套式PCR和TagMan荧光定量PCR等病原检验的3种方法和综合判定. 本标准适用于虾肝肠胞虫病的诊断、监测、检疫和流行病学调查. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不 沙 品兄尽4甲 文件，仅注日期的版本适用于本文件. 凡是不注日期的引用文件，其最新版本包括的修改单）适用文件 GB/T28630.4一2012白斑综合(WSD诊断规程第4部分织病理学诊断法 SN/T1193基因检验实验室技术要求 3缩略语 下列缩略语适用于翠文件 bp:碱基对(base pair DNA:脱氧核糖极酸(deoxyribonueleic acid EB:溴化乙啶(hidium bromude) EHP:虾肝肠胞虫(Enterocytozoon he patopenaei RESEARCH PCR:聚合酶链反应polymerase chain reaction SWP:孢子壁蛋白( spore wall protein) SSU rRNA:小亚单位核糖体核糖核酸(Small subunit fibosomak ribonucleic acid Taq:水生栖热菌Thermus) Tris:三羟甲基氨基甲烷(tris hydroxymethyl aminomethane) 4试剂和材料 3⊥N 4.1除非另有说明，在分析中仅便用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或丢离子水或相当纯度的水. 4.2组织病理法所用试剂和材料：除阳性对照、阴性对照外.按照GB/T28630.4一2012中第3章的规定 执行. 4.3无水乙醇：分析纯. 4.410XPCR缓冲液：随Tag DNA聚合酶提供，一20C保存 4.5MgCl2(25mmol/L):一20℃保存. 4.6 dNTPs(各2.5mmol/L):含dCTP、dGTP、dATP、dTTP各2.5mmol/L的混合物，一20℃保存，用 于PCR. 4.7 Tag DNA聚合酶(5U/L):一20℃保存. 4.82X预混液(2 XPremix Ex Tag). 4.9套式PCR引物的目的基因为SWP基因，对虾肝肠胞虫有很高的特异性，浓度为10umol/L.序列 如下： 514F:5'-TTG-CAGAGT-GTT-GTT-AAG-GGT-TT-3'; 514R:5'-CAC-GAT-GTG-TCT-TTG-CAA-TTT-TC-3'; 147F:5'...
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