SC/T 7234-2020 白斑综合征病毒(wssv)环介导等温扩增检测方法.pdf

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ICS65.020.30 B41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7234-2020 白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温 扩法 Detection method by loop-mediated isothermal amplification for white spot syndrome virus 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 SC/T7234—2020 全农业食品标准 公共股务平台 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布 食典通 不承担识别这些专利的责任. 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出. 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口. 本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所. 本标准主要起草人:黄使、张庆利、邱亮、徐婷婷、桑松文、万晓媛、梁艳、杨冰、李晨. I SC/T7234-2020 白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温扩增检测方法 1范围 本标准给出了白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温扩增检测所需试剂和材料、器材和设备、操作步骤 和结果判定的要求. 本标准适用于白斑综合征病毒的初筛检测 2规范性引用文件 PUBII 下列文件对于本文件的应用是必石可砂的. 文件,仅注期的版本适用于本文件. 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本件 GB/T28630.22012白定综合CWSD)诊断规程第2部分:套式PCR检测法 3缩略语 下列缩略语适用于文件 Bst酶:Bst2.0热启动DNA聚合前B2.0 WarmStart NA Polymer dNTP:脱氧核三磷酸(deoxyrihonucleoside triphosphate LAMP:环介导等温扩增loop toediated isothermal aniplificatio WSSV:白斑综合征病white spot syndrome viros) RESEARCH 4试剂和材料 4.1除非另有说明,在分 析中仅使用确认为分析纯的试剂和去离子水或蒸馏水或相当纯度的水. 4.2引物: m WSSV-F3:5 ACG GAC GGAGGA CCC mol/L 2℃保存: WSSV-B3:5'GCA ACATEC TTTCC 3.10 mot L 20℃保有 WSSV-FIP:5'GGGTCG TCG AAT GIT GCC CAT TFI GCE TAC GOA CCA ATC TGT G-3' 20umol/L 一20℃保存; WSSV-BIP:5'-AAA GGA CAA ECC CTC TTA GAA CGG AAG AAA CTG CCT T-3' 20gmol/L 一20℃保存 4.310 X Isothermal Amplification Buffer:商品化产品,稀释为1X工作液时内含20mmol/L.Tris-HCl 50mmol/LKCl 10mmol/L.(NH)SO 2mmol/L.MgSO 0.1%Tween20,或其他等效等温扩增缓 冲液. 4.4dNTP(各20mmol/L):含dATP、dTTP、dCTP、dGTP各20mmol/L 按附录A中A.1的规定执 行,一20℃保存,避免反复冻融. 4.5甜菜碱(Betaine):浓度5mol/L 按A.2的规定执行,一20℃保存,避免反复冻融. 4.6硫酸镁(MgSO):浓度100mmol/L 一20℃保存. 4.7 Bst ...

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