ICS65.020.30 B41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7235-2020 罗非鱼链球菌病诊断规程 Code of diagnosis for tilapia streptococcosis 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 SC/T7235-2020 全国农业品标准 前 共服务平台 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布制 别这些专利的素任 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出. 食 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156归M. 本标准起草单位：中国水产科学研究院珠江水产研究所. 本标准主要起草人：张德锋、石存斌、刘鹏威、任燕、王庆、曾伟伟、潘厚军、常藕琴. I SC/T7235—2020 罗非鱼链球菌病诊断规程 1范围 本标准给出了罗非鱼链球菌病诊断所需试剂和材料、器材和设备、临床症状，规定了采样、细菌分离与 纯化培养、生理生化鉴定、PCR检测与综合判定等方法. 本标准适用于罗非鱼链球菌病的流行病学调查、诊断和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的口儿是B期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件. 凡是不注日期的引用文件，其最新版包话的修改单)适用少文州 GB4789.9食品安全国家标食微生物学检验 肠弯曲检验 GB4789.28食品安全国家标准 食品微生物学检验培养和试的质量要求 SC/T7014一2006水生动物检疫实验技术规范 SC/T7201.1一2006人鱼类细菌病技术规程第部分：通用技 3缩略语 下列缩略语适用于本义件 16 S rRNA:16S核糖体RNA(5 S ribosoumal RNA BHI:脑心浸液肉汤培养基(brain hcart infusion) RESEARCH bp:碱基对(base pair) CTAB:十六烷基三甲基化 ammonium brom de) DNA:脱氧核糖核酸(deoxvribenucleic acid) dNTPs:脱氧核糖核书 E磷酸(deoxy triphosphate) EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid H2Oz:过氧化氢(hydrogen peroxide) PCR:聚合酶链式反应polymerase chaiu reaotion SDS:十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sullat Taq酶：水生栖热菌DNA聚合&quatics DNA polymerase Tris:三羟甲基氨基甲烷(tris hydroxymethyl aninomethane) V.P:伏普反应(Voges-Proskauer test) 名乙酰甲基甲醇试验 4试剂和材料 4 1除非另有说明，标准中使用的水为蒸馏水、去离子水或与其相当纯度的水. 4.216SRNA基因序列扩增引物27F:5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3 1492R:5'-TACG GYTACCTTGTTACGACTT-3'.一20℃保存. 4.3 dNTPs(各10mmol/L) 含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各10mmol/L的混合物，一20℃保存. 4.410XPCR缓冲液，无Mg2离子，一20℃保存. 4.5 Tag DNA聚合酶(5U/uL) 一20℃保存. 4.6细菌生化鉴定管或生化鉴定卡，商品化试剂. 4.7脑心浸液肉汤琼脂培养基见附录A中的A.1. 4.8血琼脂...
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