ICS11.220 B41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3464-2019 牛泰勒虫病诊断技术 Diagnostic techniques for bovine theileriosis 2019-08-01发布 2019-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3464-2019 前 公共服务平台 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出. 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本标准起草单位：中国农业科学院兰州兽医研究所. 本标准主要起草人：罗建勋、刘军龙、关贵全、殷宏、刘爱红、李有全. I NY/T3464-2019 牛泰勒虫病诊断技术 1范围 本标准规定了环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫的检测技术及其所引起的牛泰勒虫病的诊断技术要求. 本标准适用于牛泰勒虫病病原检测及急性临床病例的诊断. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件. 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. PBS:磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution) PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction) 4材料与试剂 4.1试剂 4.1.1除特别规定外，在检测中使用的试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682的要求. 4.1.2姬姆萨(Giemsa)染色液原液（见附录A中的A.1). 4.1.3姬姆萨染色液工作液（见A.2). 4.1.4甲醇. 4.1.5香柏油. 4.1.62 XPremix Tag酶混合液（商用）：包含DNA聚合酶、缓冲液和2.5mmol/L的dNTP混合物. 4.1.7无RNase水. 4.1.8全血基因组提取试剂盒. 4.1.9琼脂糖（电泳级）. 4.1.101×TAE(见A.3). 4.1.1110mg/mL溴化乙锭(EB)或同类核酸染料（见A.4). 4.1.12环形泰勒虫阳性对照（用环形泰勒虫感染牛，染虫率达到5%以上时，提取血液基因组DNA 稀 释至1ng/uL). 4.1.13瑟氏泰勒虫阳性对照（用瑟氏泰勒虫感染牛，染虫率达到5%以上时，提取血液基因组DNA 稀 释至1ng/pL). 4.1.14泰勒虫阴性对照（筛选泰勒虫阴性牛，提取血液基因组DNA 稀释至1ng/uL). 4.2耗材 4.2.1载玻片. 4.2.2抗凝真空采血管. 4.2.3剪毛剪. 4.2.41.5mL无菌离心管. 1 ...
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