ICS65.020.01 B04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3631-2020 茶叶中可可碱和茶碱含量的测定 高效液相色谱法 Determination of theobromine and theophylline in tea- High performance-liquid chromatography 2020-07-27发布 2020-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3631-2020 前 全国农业食品标准 公奠服经平台 食典通 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口. 本标准起草单位：中国农业科学院茶叶研究所、农业农村部茶叶质量监督检验测试中心. 本标准主要起草人：刘新、蒋迎、周苏娟、汪庆华、马桂岑、陈利燕、张颖彬. I NY/T3631-2020 茶叶中可可碱和茶碱含量的测定高效液相色谱法 1范围 本标准规定了茶叶中可可碱、茶碱含量的高效液相色谱测定法. 本标准适用于茶叶中可可碱、茶碱含量的测定. 本方法可可碱的定量限为3.2mg/kg 茶碱的定量限为4.4mg/kg. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 口是B期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件. 凡是不注日期的引用文件，其最新版本包括的修改单)适用 文代 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T8303茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定 ING 3原理 茶叶试样中的可可碱利茶碱用7℃热水提取，经净化，过滤容、C反相液相色谱柱梯度洗脱分离， 271nm波长处测定，外标法定量 4试剂和材料 EAR 除非另有说明，本方法使用试剂为分析纯.水应符合GBT6682中一级水的要球 4.1乙腈(C2HN CAS:75-05-8)色谱纯 4.2甲醇(CHO CAS 67-56-1):色谐纯 4.3甲酸(CH2O2CAS:64=186 4.4氢氧化钠(NaOH 6AS:1310-73-2) CH CE 4.5重质氧化镁(MgQ.CAS:1309-48-4):分析纯氧化镁经900℃灼烧30mn 即为重质氧化镁，储存于干 燥器中. 4.6可可碱(C7HNO2入S.83-670):纯度9 31 4.7茶碱(C HgN4O2、CAS:58-559):纯度98%. 4.8液相流动相B:取5mL甲酸(4.3)用水定容至1上 4.9标准储备溶液(1000mg/L):分别称取可可碱(4.6)0.1g(精确至0.0001g)、茶碱(4.7)0.1g(精确 至0.0001g) 用甲醇(4.2)分别定容至100mL(其中可可碱标准物质可先用少量2g/L的NaOH溶液溶 解).配制好的1000mg/L的标准储备液储存于一18℃冰箱，储存期6个月. 4.10混合标准工作液：分别准确移取10L、20gL、50gL、100gL、250L、500L、1000gL可可碱和1 μL、2uL、5uL、10uL、20uL、50uL、100uL茶碱的标准储备溶液(4.9)用水或初始流动相稀释并定容至 10mL 得到一系列标准工作液（质量浓度分别为可可碱1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L、25mg/L、50 mg/L、100mg/L 和茶碱0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L) 0℃~ 5℃保存，保存期1个月. 4.11微孔滤膜：孔径0.45μm 水相. 5仪器设备 5.1高效液相色谱仪：配备紫外或二极管阵列检测器. 5.2分析天平：...
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