ICS59.140.20 X45 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3307-2018 动物毛纤维源性成分鉴定 实时荧光定性PCR法 Identification of animal-derived materials in wool fibers- Qualitative realtime PCR method 2018-12-19发布 2019-06-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3307-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出. 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC274)归口. 本标准起草单位：山东省农业科学院生物技术研究中心. 本标准主要起草人：张全芳、刘艳艳、范阳阳、胡悦、马德源、王俊燕、李燕、杨雪、谭晴晴、陈雪燕、刘 国霞、步迅、王兴军. I NY/T3307-2018 动物毛纤维源性成分鉴定实时荧光定性PCR法 1范围 本标准规定了对水貂、狐狸、兔、骆驼、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物毛纤维源性成分进行鉴定的实时 荧光定性PCR法. 本标准适用于动物毛纤维中水貂、狐狸、兔、骆驼、山羊、绵羊、鸭和鹅8种源性成分的定性检测. 本方法检出限为1%. 2规范性引用文件 RD 下列文件对于本文件的应用是 不口 PUBLISH 少的.凡是注日期的 用 仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件其最新版木（包括的修改单适用于术文件. GB/T6682/分析实验室用水规格和试验方法 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 RESEARC 实时荧光PCR-qualitative real time PCR 在PCR反应体系中加人荧光基因，利用荧光信号积累实时监控整个PCR进程：对未知模板进行定 性或定量分析 3.2 Ct值cycle threshold 每个反应管内的荧光信号达到设定的國值时所经历的循环数 3⊥N3O 4原理 根据线粒体16SDNA基因在不同物种间保守区设计通用物：在可变区设计物种特异性探针， 采用TaqMan实时荧光PCR技术进行扩增根据PCR扩增反应的荧光信号及循环阈值，判定水貂、狐 狸、兔、骆驼、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物源性成分. 5试剂或材料 除另有规定外，仅使用分析纯试剂. 5.1水，GB/T6682 一级. 5.21mol/L Tris-HC1(pH6.4)溶液：称取12.1 g Tris置于100mL烧杯中，加人80mL水，用浓 HCl调节pH至6.4，加水定容至100mL 103.4kPa蒸汽压(121℃)灭菌20min 室温保存待用. 5.31mol/LTris-HCl(pH8.0)溶液：称取12.1 g Tris置于100mL烧杯中，加人80mL水，用浓 HC1调节pH至8.0，加水定容至100mL 103.4kPa蒸汽压(121℃)灭菌20min 室温保存待用. 5.40.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液：称取18.61gNa2EDTA2H2O置于100mL烧杯中，加入 80mL水，用10%的NaOH溶液，调节pH至8.0，加水定容至100mL 103.4kPa蒸汽压(121℃)灭菌 20min 室温保存待用. 1 ...
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