ICS65.120 B25 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3310-2018 苏丹草和高丹草品种真实性鉴别 SSR标记法 Identification for variety genuineness of sudangrass and the hybrid of sorghum and sudangrass-SSR marker method 2018-12-19发布 2019-06-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3310-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出. 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC274)归口. 本标准起草单位：全国畜牧总站、农业农村部全国草业产品质量监督检验测试中心、青岛农业大学、 北京市农林科学院、新疆农业大学. 本标准主要起草人：冯葆昌、高秋、马金星、孙娟、庞斌双、王凤格、张博、李存福、李玉荣、齐晓、刘芳、 张义、闫敏、屠德鹏、何珊珊、王梅娟. NY/T3310-2018 苏丹草和高丹草品种真实性鉴别SSR标记法 1范围 本标准规定了利用SSR(Simple Sequence Repeat 简单重复序列)标记，进行苏丹草[Sorghum su- danense(Piper)Stapf.cv.]及其杂交种高丹草(Sorghum bicolor X Sorghum sudanense)品种真实性鉴别 的方法及判定规则. 本标准适用于苏丹草及其杂交种高丹草品种真实性鉴别 2规范性引用文件 RD PUBLISH 下列文件对于本文件的应用是必不可少 凡是注日期的用文 仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本《包括的修改单)适月于本文 GB/T2930.1牧草种子检验规程托样 GB/T2930.4牧草子检验规程发芽试验 GB/T6682 分析实验室用水规格和验方法 3原理 RESEA 不同苏丹草和高丹草品种的基因组中，存在着稳定遗传的SSR标记.通过比较送检样品与对照品 种SSR标记扩增产物片段大小差异（位点差异），判定送检样品的真实性 4试剂与材料 除另有规定外，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂 4.1水：符合GB/T6682 规定的三级水 4.2异丙醇(C3HO) 4.3无水乙醇(C2H6O CH CENTER 4.4四甲基乙二胺(CH) 4.5去离子甲酰胺(CHNO). 4.6 Taq DNA聚合酶. 4.7剥离硅烷. 4.8矿物油. 4.9DNA分析仪用分子量内标. 4.10荧光素. 4.1110XPCR缓冲液（含Mg2). 4.120.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液：称取18.61g二水合乙二胺四乙酸二钠(Nag EDTA2H2O)溶 于80mL水中，用固体氢氧化钠(NaOH)将pH调至8.0，加水定容至100mL 高压灭菌. 4.130.5mol/L盐酸溶液：取25mL浓盐酸(HC) 加水定容至500mL. 4.141mol/L Tris-HCl溶液(pH8.0):称取12.11g三羟甲基氨基甲烷[NH2C(CH2OH)a]溶于适量 水中，加0.5mol/L盐酸溶液(4.13)调pH至8.0，加水定容至100mL 高压灭菌. 4.15CTAB提取液：称取81.70g氯化钠(NaC1)和20.00g十六烷基三甲基溴化铵[C16H3(CH3)NBr]溶于 1 ...
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