ICS11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T34750-2017 副猪嗜血杆菌检测方法 Detection methods for haemophilus parasuis 2017-11-01发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 制涂层查真伪 GB/T34750-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本标准起草单位：河南省动物疫病预防控制中心、河南省农业科学院畜牧兽医研究所、河北农业大 学动物科技学院、山东省农业科学院畜牧兽医研究所. 本标准起草人：吴志明、闫若潜、张健、赵明军、赵雪丽、宋勤叶、徐引弟、王东方、王淑娟、安春霞、 刘梅芬、张盼盼、谢彩华、高凤山、方先珍、吴家强、拜廷阳、王一、刘淑敏. I GB/T34750-2017 副猪嗜血杆菌检测方法 1范围 本标准规定了副猪嗜血杆菌的分离与鉴定、巢式PCR检测和实时荧光PCR检测方法. 本标准适用于对猪的肺脏、心脏、脑等组织，胸腔、腹腔、心包积液或关节液，抗凝血，细菌培养物等 样品中副猪嗜血杆菌的检测. 2缩略语 下列缩略语适用于本文件. bp:碱基对(Base Pair) DNA:脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid) dNTPs:脱氧核糖核苷三磷酸(Deoxyribonucleoside Triphosphates.) MGB:小沟结合(Minor Groove Binder) NAD:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide Adenine Dinucleotide) PBS:磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer Solution) PCR:聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) Taq酶：Tag DNA聚合酶(Tag DNA Polymerase) TE:Tris-EDTA缓冲液(Tris-EDTA Buffer) TSA:胰蛋白陈大豆琼脂(Tryptic Soy Agar) TSB:胰蛋白陈大豆肉汤(Tryptic Soy Broth) 3仪器 3.1生物安全柜. 3.2恒温培养箱. 3.3光学显微镜. 3.4全自动微生物鉴定仪. 3.5PCR扩增仪. 3.6高速冷冻离心机(12000×g以上). 3.7核酸电泳仪和水平电泳槽. 3.8恒温水浴锅. 3.9单道微量移液器(0.5gL~10gL;2L~20pL;20gL~200pL;100L~1000L). 3.10组织匀浆器或研钵. 3.11凝胶成像系统（或紫外投射仪）. 3.12实时荧光定量PCR仪. 4耗材 4.11.5mL无菌离心管. ...
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