ICS11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T35912—2018 猪繁殖与呼吸综合征病毒 荧光RT-PCR检测方法 Real-time RT-PCR method for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus 2018-02-06发布 2018-09-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 刮涂层查真伪 GB/T35912-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中国农业科学院上海兽医研究所、中华 人民共和国深圳出入境检验检疫局、湖南圣湘生物科技有限公司、中国检验检疫科学研究院. 本标准主要起草人：张强、李健、熊炜、童光志、赵和平、李树清、花群义、杨忠苹、李国新、王巧全、 王艳、林颖峥、蔡开妹、喻正军、林祥梅、吴绍强. I GB/T35912—2018 猪繁殖与呼吸综合征病毒 荧光RT-PCR检测方法 1范围 本标准规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测的操作方法. 本标准适用于猪繁殖与呼吸道综合征病毒美洲型毒株核酸检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T25172猪常温精液生产与保存技术规范 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. Real-time RT-PCR:荧光反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcript polymerase chain re- action) Ct值：每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数(cycle threshold) RNA:核糖核酸(ribonucleic acid) Taq酶：Taq DNA聚合酶(Tag DNA polymerase) TE缓冲液：Tris-EDTA缓冲液(Tris-EDTA buffer) DEPC:焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate) PRRSV:猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus) PBS:磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution) 4仪器 4.1荧光PCR检测仪. 4.2高速台式冷冻离心机：可控温至4℃、离心速度可达12000r/min以上. 4.3组织研磨器或者研钵. 4.4普通冰箱：2℃~8℃. 4.5超低温冰箱：可控温至一70℃以下. 4.6微量移液器：0.2L~2uL、1gL~10gL、10L~100L、20L~200gL、100L~1000gL 并 配备与移液器匹配的吸头. 4.7高压灭菌锅. 1 ...
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