GB/T 36833-2018 马铃薯X病毒检疫鉴定方法.pdf

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ICS65.020.01 B16 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T36833-2018 马铃薯X病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Potato virus X 2018-09-17发布 2019-04-01实施 国家市场监督管理总局 中国国家标准化管理委员会 发布 30 GB/T36833-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、中华人民共和国中山出人境检验检疫 局、中国检验检疫科学研究院、浙江大学、中华人民共和国山东出人境检验检疫局. 本标准主要起草人:刘洪义、刘忠梅、车瑞丰、陈定虎、魏梅生、张星哲、李桂芬、张永江、吴建祥、 封立平、袁建江、杨立群. 1 GB/T36833-2018 马铃薯X病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了马铃薯X病毒的检疫鉴定方法. 本标准适用于可能带有马铃薯病毒的马铃薯植株、繁殖材料及其他寄主植物的检疫鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB7331马铃薯种薯产地检疫规程 SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样方法 3马铃薯X病毒基本信息 中文名:马铃薯X病毒 学名:Potato virus X 缩写:PVX 分类地位:甲型线状病毒科(Alphaflexiviridae) 马铃薯X病毒属(Potexvirus). 传播途径:田间自然条件下主要靠寄主植株不同部位、寄主植株之间接触摩擦进行机械传播,在农 事或园艺操作中,还可以借助有关工具器械进行传播.远距离传播通过种薯等无性繁殖材料的调运完 成.有资料表明马铃薯实生种子可传带该病毒,但在生产上意义不大;未见其他茄科作物种子传带该病 毒的资料.据报道,某些昆虫如异黑蝗(Melanoplus differentialis)和绿丛螽斯(Tettigonia viridissima)的咀嚼式口器经机械作用可传播该病毒,菟丝子(Cuscuta cam pestris)和集合油壶菌 (Synchyrtium endobioticum)也能传播该病毒. 马铃薯X病毒的其他信息参见附录A. 4方法原理 PVX的基因组特征和免疫原性是该病毒检疫鉴定的依据.依据PVX的基因组特征建立反转录 PCR(RT-PCR)、实时荧光反转录PCR(Real-time RT-PCR)和反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检 测方法;依据PVX免疫原性建立酶联免疫吸附测定(ELISA)方法、免疫层析试纸条检测方法和斑点酶 联免疫吸附测定(dot-ELISA)方法;通过这些方法的有效组合,判断样品是否带有PVX. 5仪器设备、用具及试剂 5.1仪器设备 酶标仪、PCR仪、实时荧光PCR仪、电泳系统、生物安全柜、小型离心机、台式冷冻离心机、水浴锅、 pH计、凝胶成像系统、制冰机、超低温冰箱、常规冰箱、电子天平(0.001g)、涡旋振荡器、组织捣碎机、超 1 ...

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