NY/T 2287-2012 水稻细菌性条斑病菌检疫检测与鉴定方法.pdf

K2HPO4,方案优化,水稻,其他规范
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ICS65.020 B16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2287-2012 水稻细菌性条斑病菌检疫检测与鉴定方法 Detection and identification for Xanthomonas oryzae pv. oryzicola(Fang et al.)Swings et al. 2012-12-24发布 2013-03-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2287-2012 前 言 本标准按照GB1.1给出的规则起草. 本标准由农业部种植业管理司提出. 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)归口. 本标准起草单位:全国农业技术推广服务中心、江苏省植物保护站、南京农业大学. 本标准主要起草人:王福祥、龚伟荣、胡白石、刘慧、褚频、李潇楠、胡婕、朱莉. I NY/T2287-2012 水稻细菌性条斑病菌检疫检测与鉴定方法 1范围 本标准规定了农业植物检疫中水稻细菌性条斑病菌检测鉴定的技术方法. 本标准适用于水稻细菌性条斑病的检测鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB8371一2009水稻种子产地检疫规程 GB15569一2009农业植物调运检疫规程 3原理 水稻细菌性条斑病是为害水稻的重要细菌病害,属国内植物检疫性有害生物.水稻细菌性条斑病 菌的田间症状、菌落形态特征、致病性测试、血清学反应和PCR反应等特征是检测与鉴定的重要依据. 4试剂与材料 无水磷酸氢二钠(Na2HPO4)、无水磷酸氢二钾(K2HPO4)、无水磷酸二氢钾(KH2PO)、碳酸钠 (Na2CO2)、碳酸氢钠(NaHCO3)、氯化钠(NaC1)、氯化钾(KC1)、氯化镁(MgCl2)、无水亚硫酸钠 (Na2SO3)、氢氧化钠(NaOH)、氢氧化钾(KOH)、碘化钾(KI)、七水硫酸镁(MgSO47H2O)、叠氮化钠 (NaN3)、草酸铵[(NH)2C2O4]、对硝基苯磷酸二钠(PNPP)、无菌水、乙醇、市售抗体、市售酶标抗体、市 售PCR试剂等.检验中所需的其他试剂与培养基,参见附录A. 除另有规定外,试剂均为分析纯或生化试剂.实验用水应符合GB/T6682中一级水的规格. 5仪器及用具 超净工作台、电子天平、磁力搅拌器、高压灭菌锅、培养箱、水浴锅、生物显微镜、体式显微镜、小型粉 碎机、高速台式离心机、酶标仪、电泳仪、紫外分光光度计、常规PCR仪、凝胶成像系统、冰箱、超低温冰 箱、超纯水器或纯水器、恒温干燥箱、微量移液器等. 6取样方法 6.1叶片取样 田间发现水稻细菌性条斑病典型或疑似症状的叶片时(见附录B) 直接采样检验. 6.2种子取样 对调运中的种子,按照GB15569一2009中6.2的要求抽样. 7检验鉴定 7.1症状识别 在水稻生长期按照GB8371一2009中8.1的要求进行田间调查,与水稻细菌性条斑病为害的典型 症状进行比较(见附录B) 符合典型症状的可进行症状鉴定.如发现疑似症状,可采用常规鉴定、 1 ...

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