ICS65.020 B16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2289-2012 小麦矮腥黑穗病菌检疫检测与鉴定方法 Detection and identification of Tilletia controversa Kuhn 2012-12-24发布 2013-03-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2289—2012 前言 本标准按照GB/T1.1给出的规则起草. 本标准由农业部种植业管理司提出. 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)归口. 本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、四川省植物检疫站、重庆大学. 本标准主要起草人：王福祥、刘可、王中康、宁红、熊红利、殷幼平、刘慧、李潇楠、万佳. I NY/T2289-2012 小麦矮腥黑穗病菌检疫检测与鉴定方法 1范围 本标准规定了农业植物检疫中小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kiuhn TCK)样品采集、样 品处理、实验室形态学、实时荧光PCR检验及结果判定和除害处理的技术方法. 本标准适用于小麦种子、籽粒及产品、生长期植株小麦矮腥黑穗病菌的检疫检测和鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB7412小麦种子产地检疫规程 GB15569农业植物调运检疫规程 GB/T18085植物检疫小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 小麦矮腥黑穗病Dwarf bunt disease 由小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kuhn TCK)引起的麦类真菌病害，特征表现为罹病植 株矮化，病穗麦粒变为病原菌冬孢子构成的菌瘦，不能食用，导致严重的产量损失并影响小麦加工产品 品质. 3.2 网脊高度值：Reticulum height 指腥黑穗病菌冬孢子外胞壁向外突起的垂直高度值，在光学显微镜下表现为冬孢子外胞壁的刺状 或齿状突起的垂直高度. 3.3 实时荧光定量PCRQ-PCR 也叫实时荧光聚合酶链式反应.是一种能在体外微量扩增的特殊DNA片段，在扩增过程中由于 荧光物质的释放而实时快速、灵敏地检出模板DNA存在的方法. 3.4 Q-PCR阈值Threshold of Q-PCR PCR反应实时荧光强度超过背景荧光强度的值或检测值. 3.5 Q-PCR Ct值Cycle threshold value of Q-PCR 实时荧光PCR反应检测样品的荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数. 3.6 典型的扩增曲线Typical amplification curve 一个典型的扩增曲线由三个阶段组成：荧光背景信号阶段、荧光信号指数扩增阶段和平台期.指数 扩增阶段PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系. ...
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