ICS65.120 B25 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2548-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定时间分辨 荧光免疫层析法 Determination of aflatoxin B in feed-Time-resolved fluorescent immunochromatographic method 2014-03-24发布 2014-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2548-2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出并归口. 本标准起草单位：中国农业科学院油料作物研究所、农业部油料及制品质量监督检验测试中心. 本标准主要起草人：李培武、丁小霞、唐晓倩、张奇、张文、王督、姜俊、周海燕、张兆威. I NY/T2548-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定时间分辨荧光免疫层析法 1范围 本标准规定了时间分辨荧光免疫层析法测定饲料中黄曲霉毒素B1的方法. 本标准适用于饲料和饲料原料中黄曲霉毒素B2的测定. 本标准黄曲霉毒素B检出限为0.30μg/kg. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样中黄曲霉毒素与乳胶标记的特异性抗体发生结合后，抑制了层析过程中抗体与硝酸纤维 素膜检测线上黄曲霉毒素B1-BSA偶联物的免疫反应，使检测线时间分辨荧光强度降低，通过检测时间 分辨荧光强度变化进行定量测定. 4试剂 除非另有规定，仅使用分析纯试剂. 4.1水，按照GB/T6682中的要求，二级. 4.2甲醇(CH3OH). 4.3蔗糖(C12H22O1). 4.4牛血清白蛋白(BSA) 纯度大于98%. 4.5吐温-20(C58H114O26). 4.670%甲醇溶液：取70mL甲醇(4.2)，加30mL水(4.1)，混匀. 4.7样品稀释液：取1.0g蔗糖(4.3)、0.5g牛血清白蛋白(4.4)和2.5g吐温-20(4.5)，溶解于 100.0mL水(4.1)中. 4.8铕标记黄曲霉毒素B1抗体溶液：黄曲霉毒素B1抗体纯度80%以上，亲和力常数不低于1.00×108 L/mol.黄曲霉毒素B1抗体与黄曲霉毒素B2、黄曲霉素G1、黄曲霉素G2交叉反应率小于10%. 4.91000ng/mL黄曲霉毒素B1标准溶液. 4.10100ng/mL黄曲霉毒素B1标准储备液：准确吸取黄曲霉毒素标准溶液(4.9)1mL于10mL容量 瓶中，甲醇定容.4℃可保存3个月. 警告： 由于黄曲霉毒素毒性很强，试验人员应注意自我保护.操作时，应避免吸入，接触黄曲霉毒素标准溶液.标准溶液 配置应在通风橱内进行，工作时应戴眼镜、穿工作服、戴医用乳胶手套.凡接触黄曲霉毒素的容器，需浸入10%次氯酸 钠溶液12以上.同时，为了降低接触黄曲霉毒素的机会，本标准鼓励直接购买并使用黄曲霉毒素的有证标准储备液. 5仪器设备与材料 5.1时间分辨荧光检测仪：能在激发波长为(365士5)nm 检测波长为(615士5)nm条件下测定. 1 ...
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