ICS65.120 B25 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2549-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 免疫亲和荧光光度法 Determination of aflatoxin B in feed- Immunoaffinity fluorescencemethod 2014-03-24发布 2014-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2549—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出并归口. 本标准起草单位：中国农业科学院油料作物研究所、农业部油料及制品质量监督检验测试中心. 本标准主要起草人：李培武、张文、胡小风、丁小霞、张奇、周海燕、陈小媚、唐晓倩、张兆威、王督. I NY/T2549-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定免疫亲和荧光光度法 1范围 本标准规定了免疫亲和荧光光度法测定饲料中黄曲霉毒素B的方法. 本标准适用于饲料及饲料原料中黄曲霉毒素B1的测定. 本标准黄曲霉毒素B2检出限为0.3μg/kg. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样中黄曲霉毒素1与免疫亲和柱中固定相上抗体发生特异性结合，其他与抗体不发生免疫亲和 反应的成分随流动相流出，利用甲醇使固定相上抗体变性，将固定相上抗体结合的黄曲霉毒素B洗脱， 荧光定量检测. 4试剂 除非另有规定，仅使用分析纯试剂. 4.1水，按照GB/T6682中的要求，二级. 4.2氯化汞(HgC12). 4.3硫酸奎宁(C20H2N2OS). 4.4甲醇(CH3OH). 4.5浓硫酸(H2SO4) 4.670%甲醇溶液：取70mL甲醇(4.4)，加30mL水(4.1)，混匀. 4.7黄曲霉毒素B1荧光增强剂：准确称取2.72g氯化汞(4.2)，溶于水中，定容至1.0L. 4.81000ng/mL黄曲霉毒素B1标准溶液. 4.9100ng/mL黄曲霉毒素B1标准储备液：准确吸取黄曲霉毒素标准溶液(4.8)1mL于10mL容量 瓶中，加甲醇定容.4℃可保存3个月. 警告： 由于黄曲霉毒素毒性很强，试验人员应注意自我保护.操作时，应避免吸入、接触黄曲霉毒素标准溶液.标准溶液 配置应在通风橱内进行，工作时应戴眼镜、穿工作服、戴医用乳胶手套.凡接触黄曲霉毒素的容器，需浸入10%次氯酸钠 溶液12h以上.同时，为了降低接触黄曲霉毒素的机会，本标准鼓励直接购买并使用黄曲霉毒素的有证标准储备液. 4.10黄曲霉毒素B标准工作液：分别准确吸取黄曲霉毒素B1标准储备液(4.9)0.00mL、0.01mL、 0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、3.00mL于10mL容量瓶中，甲醇定容，分别相当于0.0ng/mL、 0.1ng/mL、0.5ng/mL、2.5ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、30.0ng/mL浓度标准工作溶液. 4.11黄曲霉毒素B1免疫亲和微柱：柱容量≥30g AFB1免疫亲和柱与其他种类黄曲霉毒素的交叉 反应率均≤10%. 1 ...
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