ICS65.120 B46 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2895-2016 饲料中叶酸的测定 高效液相色谱法 Determination of folic acid in feeds- High performance liquid chromatography 2016-05-23发布 2016-10-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2895—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由农业部畜牧业司提出. 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口. 本标准起草单位:北京市饲料监察所. 本标准主要起草人:冯秀燕、杨宝良、魏秀莲、徐理奇、丁美方、郑君杰、方芳、刘钧、王继彤、张亚君、 吴翠玲、贾涛、孙志伟、裘燕、吕宝苹、卢春香、娄迎霞、姚婷. I NY/T2895-2016 饲料中叶酸的测定高效液相色谱法 1范围 本标准规定了饲料中叶酸含量测定的高效液相色谱方法. 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料(反刍动物饲料除外)中叶酸的测定. 本标准的方法定量限为0.3mg/kg. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3原理 用碳酸钠溶液提取饲料中的叶酸,提取液经阴离子交换固相萃取小柱净化富集后,注入反相高效液 相色谱仪反相色谱系统中进行分离,用紫外检测器检测. 4试剂和材料 除非另有规定,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级用水. 4.1甲醇:色谱纯. 4.20.1mol/L碳酸钠溶液:称取10.6g无水碳酸钠,用水溶解并定容至1000mL. 4.30.1mol/L EDTA溶液:称取37.2g二水合乙二胺四乙酸二钠,用水溶解并定容至1000mL. 4.40.05mol/L磷酸二氢钠溶液(pH=6.30):称取二水合磷酸二氢钠7.8g 用水溶解并定容至1000 mL.用0.1mol/L的NaOH调pH至6.30. 4.5固相萃取洗脱液:甲酸甲醇水=57520. 4.6叶酸对照品:纯度大于等于97.4%. 4.7叶酸标准储备液:准确称取叶酸对照品适量,用0.1mol/L碳酸钠溶液溶解,加入100μg抗坏血 酸并用水定容至50mL棕色容量瓶中,配制成250μg/mL的标准储备液.4℃避光保存,有效期为2 个月. 4.8叶酸标准工作液:准确量取1mL叶酸标准储备液,用水定容至50mL容量瓶中,稀释成5.0g/ mL的标准工作溶液.现配现用. 4.9固相萃取柱:200mg/6mL 混合型阴离子交换柱. 4.10微孔滤膜(PTFE):0.22m. 5仪器和设备 5.1高效液相色谱仪:配紫外检测器或二极管阵列检测器. 5.2分析天平:感量0.1mg. 5.3超声波振荡器. ...