ICS67.080.10 B31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3032-2016 草莓脱毒种苗生产技术规程 Technical code for the production of virus-free strawberry stock 2016-12-23发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T3032-2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国果品标准化技术委员会(SAC/TC510)归口. 本标准起草单位：沈阳农业大学、北京市农林科学院林业果树研究所、湖北省农业科学院经济作物 研究所. 本标准主要起草人：张志宏、刘月学、张运涛、顾玉成、代红艳、常琳琳、李贺、王桂霞、向发云、马跃、 韩永超. I NY/T3032-2016 草莓脱毒种苗生产技术规程 1范围 本标准规定了草莓茎尖培养脱毒方法、脱毒种苗保存与繁殖、检测病毒种类和RT-PCR检测方法. 本标准适用于草莓脱毒种苗的培育及草莓活体材料中病毒的检测. 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 2.1 茎尖培养脱毒virus elimination by shoot tip culture 取0.2mm~0.5mm的茎尖，经组织培养获得无病毒植株的过程. 2.2 脱毒原原种苗breeder’s virus-free stock 通过茎尖培养获得的不携带草莓镶脉病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓斑驳病毒且未经过组培增殖的 无病毒原始植株. 2.3 脱毒原种苗original virus-free stock 脱毒原原种苗通过匍匐茎繁殖方式繁育出的无病毒植株. 2.4 脱毒种苗virus-free stock 脱毒原种苗通过匍匐茎繁殖方式繁育出的无病毒植株. 3茎尖培养脱毒方法 3.1茎尖剥离及接种 田间选择表现品种特性的健壮植株并做标记. 在匍匐茎发生初期，采集长约2cm的匍茎顶端，在超净工作台上去掉外层苞叶，用70%乙醇表面 消毒30s 然后用2%的次氯酸钠溶液消毒10min 再用无菌蒸馏水冲洗3遍.逐层剥去匍匐茎顶端上 的叶原基，用无菌刀片切取0.2mm~0.5mm大小的茎尖，接种在分化培养基上（培养基配方参见附 录A). 将接种后的培养瓶置于(23士2)℃、光照强度约2400lx、每天光照时间14h~16h的培养室中进行 培养. 3.2茎尖分化成苗 茎尖培养2个月后，分化成带有叶原基的小芽，将小芽转接到新鲜的分化培养基上继续培养. 当小芽长出叶片后，将带有叶片的小芽转移到成苗培养基上（培养基配方参见附录A) 大约培养2 个月后分化成苗丛. 对苗丛进行编号，然后从苗丛上剪取叶片进行病毒检测，淘汰感染病毒的苗丛，保留无病毒苗丛. 3.3生根和移栽 从脱毒苗丛上剪取株高在2cm以上的试管苗，将试管苗基部的小芽切除，然后接种在生根培养基 中（培养基配方参见附录A).在组培室中生根培养30d~40d后，将培养容器置于覆盖100目纱网的 1 ...
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