ICS07.080 B47 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3166-2017 家蚕质型多角体病毒检测 实时荧光定量PCR法 Detection of Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus-Real time PCR method 2017-12-22发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T3166-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由农业部种植业管理司提出. 本标准由全国桑蚕业标准化技术委员会归口(SAC/TC437). 本标准起草单位：江苏科技大学、中国农业科学院蚕业研究所、农业部蚕桑产业产品质量监督检验 测试中心（镇江）、苏州大学、西南大学、华南农业大学. 本标准主要起草人：吴萍、郭锡杰、陈涛、贡成良、潘敏慧、李龙、孙京臣. I NY/T3166-2017 家蚕质型多角体病毒检测实时荧光定量PCR法 1范围 本标准规定了家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus)的实时荧光定 量PCR检测方法. 本标准适用于家蚕中肠组织中家蚕质型多角体病毒的检测 2规范性引用文件 PUBI/ 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的列用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，草新版本（包括的修改单）造本文件. GB/T6682分析实验室月水规格和试验方法 3缩略语 下列缩略语适用毛文件 RES BmCPV:家蚕质型多角体病毒(Bombyr mori cytoplasmic polyhedrosis VIruS bp:碱基对(base pair) C值：每个反应管内的荧光信号达到设定的國值时所经历的循环数 cDNA:与mRA 互补的DNA分子(plementary deoxyribonucleic acid) DEPC:焦碳酸乙酯(diethypyroearbonate dNTPs:脱氧核 由四种脱氧核糖核 苷酸dATP、dTTP、dGTP和dCTP等量混合而成的溶 PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction) 4原理 CENT 根据BmCPV多角体蛋白基因的保守序列设计特异性PCR引物进行 扩增反应.利用荧光信 号伴随目的PCR产物的墩加面增强的原理，根据C值判断样品是否感 染多蚕质型多角体病毒. 5试剂与设备 5.1试剂与耗材 除另有规定外，所用生化试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682一级水要求并经灭菌或采 用超纯水.提取RNA所用试剂应使用无RNA酶的灭菌双蒸水或超纯水配制，分装的容器应无RNA 酶污染. 5.1.1RNA提取试剂. 5.1.2三氯甲烷. 5.1.3异丙醇. 5.1.475%乙醇. 5.1.5DEPC. 5.1.6cDNA合成试剂盒. 5.1.7荧光定量PCR试剂盒. ...
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