ICS65.150 B50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7217-2014 刺激隐核虫病诊断规程 Protocol of diagnosis for cryptocaryoniasis 2014-03-24发布 2014-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 SC/T7217-2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由农业部渔业局提出. 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口. 本标准起草单位：中山大学、中华人民共和国广州出入境检验检疫局. 本标准主要起草人：李安兴、柏建山、李言伟. L SC/T7217-2014 刺激隐核虫病诊断规程 1范围 本标准规定了刺激隐核虫病临床症状检查、刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)形态学鉴定和聚合 酶链式反应(PCR)检测的方法. 本标准适用于刺激隐核虫病的流行病学调查、诊断、检疫和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 刺激隐核虫病cryptocaryoniasis 由刺激隐核虫感染海水硬骨鱼类体表和鳃，并引起鱼类发病或死亡的一种疾病. 4试剂和材料 4.1水：符合GB/T6682中一级水的规格. 4.2蛋白酶K(20mg/mL). 4.3引物：浓度为10umol/L. 引物1：5'-GTTCCCCTTGAACGAGGAATTC-3' 引物2：5'-TTAGTTTCTTTTCCTCCGCT-3' 引物3：5'-TGAGAGAATTAATCATAATTTATA-3' 4.4 DNA marker(DL2000 marker). 4.5PCR试剂：Tag DNA聚合酶、10 XPCR buffer、MgCi2、dNTPs.、灭菌双蒸水. 4.6微量样品基因组DNA抽提试剂盒（可使用其他同等效果的试剂盒）. 4.7PCR产物回收试剂盒. 4.8琼脂糖（分析纯）. 4.9TE缓冲液，见附录A. 4.105XTBE贮存液，见附录A. 4.11EB溶液，见附录A. 4.1210×加样缓冲液. 4.13其他化学试剂(HC1、H:BO3等)：分析纯级产品. 5仪器设备 5.1解剖盘、剪刀、镊子. 1 ...
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