ICS65.020.30 B50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7221-2016 蛙病毒检测方法 Detection method of ranavirus 2016-12-23发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部发布 SC/T7221-2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由农业部渔业渔政管理局提出. 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口. 本标准起草单位:北京市水产技术推广站、北京出人境检验检疫局、全国水产技术推广总站、中国检 验检疫科学研究院. 本标准主要起草人:潘勇、张利峰、李清、徐立蒲、江育林、余卫忠、张文、曹欢、王小亮、王姝、王静波、 那立海、贾丽. I SC/T7221-2016 蛙病毒检测方法 1范围 本标准规定了蛙病毒病病原的术语和定义、试剂和材料、仪器和设备、概述、分离、鉴定和综合判定. 本标准适用于蛙病毒病的流行病学调查、诊断、检疫和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 蛙病毒ranavirus 虹彩病毒科(Iridoviridae)蛙病毒属(Ranavirus)中除流行性造血器官坏死病毒(Epizootic haemato- poietic necrosis virus EHNV)和欧洲病毒(European catfish virus ECV)外的其他成员. 3.2 蛙病毒病infection with ranavirus 蛙病毒属的多种病毒(不包括流行性造血器官坏死病毒和欧洲病毒)感染有尾和无尾目动物的一 类系统性临床与亚临床感染. 4试剂和材料 4.1蛙病毒参考株:由农业部指定的水生动物病原微生物菌(毒)种保藏机构提供. 4.2胖头鳄肌肉细胞系(FHM)、鲤上皮瘤细胞系(EPC)、大鳞大麻哈鱼胚胎细胞系(CHSE)、蓝鳃太阳 鱼细胞系(BF-2):采用M199培养液培养. 4.3水:符合GB/T6682中一级水的要求. 4.4无水乙醇:分析纯,使用前预冷到一20℃. 4.5dNTP:含有浓度均为10mmol/L的dCTP、dGTP、dATP和dTTP 一20℃保存. 4.6Taq酶:10U/L 一20℃保存,避免反复冻融或温度剧烈变化. 4.7引物:浓度为10mol/L.序列如下: 上游引物F1:5'-CGC-AGT-CAA-GGC-CTT-GAT-GT-3'; 下游引物R1:5'-AAA-GAC-CCG-TTT-TGC-AGC-AAA-C-3'; 扩增蛙病毒主要衣壳蛋白基因中585bp的片段. 4.8MgCl2:25mmol/L. 4.9琼脂糖:电泳纯. 4.10矿物油:要求无DNA酶和RNA酶. ...
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