ICS65.020.30 B41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7226-2017 鲑甲病毒感染诊断规程 Diagnostic protocol for salmonid alphavirus 2017-06-12发布 2017-10-01实施 中华人民共和国农业部发布 SC/T7226—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由农业部渔业渔政管理局提出. 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口. 本标准起草单位：东北农业大学、全国水产技术推广总站、中国检验检疫科学研究院、北京出入境检 验检疫局. 本标准主要起草人：刘敏、余卫忠、昌永辉、江育林、张利峰、任彤. I SC/T 7226—2017 鲑甲病毒感染诊断规程 1范围 本标准给出了鲑甲病毒感染的临床症状检查，规定了样品采集及处理、病毒分离、病毒鉴定及结果 的综合判定的方法. 本标准适用于鲑甲病毒感染鲑科鱼类引起的胰脏病和昏睡病的流行病学调查、疾病诊断、检疫和 监测. 2规范性引用文件 PUBLIS 下列文件对于本文件的应用悬必心不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文体最新版本（包括的修改单）适用子C文 牛 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088 出入境动物检疫采样 SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范 3缩略语 下列缩略语适用本文件. RESEARCH CHSE-214:大鳞大马哈鱼胚胎细胞系(Chinook salmon embryo cell line) CPE:细胞病变效应(Cytopathic effect) DEPC:焦碳酸乙酯(Diethyl pyrocarbonate) dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate) FCS:胎牛血清(Fetal calf serum) CE RT-PCR:逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chai reaction) SAV:鲑甲病毒(Salmonid alphavirus) 4试剂和材料 3⊥N 4.1水：应符合GB/T6682中一级标准水 4.2SAV参考株：由农业部指定的动物病原微生物菌（毒）种保藏机构提供. 4.3CHSE-214细胞. 4.4 Trizol试剂，4℃保存. 4.5M-MLV反转录酶(200U) 一20℃保存 4.6DNA分子量标准：DL2000. 4.7溴化乙锭. 4.8琼脂糖：电泳级. 4.9dNTP:10mmol/L 一20℃保存. 4.10 Tag DNA聚合酶：5U/uL 一20℃保存. 4.11RNA酶抑制剂(40U/μL) 一20℃保存. 4.12TBE电泳缓冲液(5倍浓缩液)：配方按附录A中A.1的规定执行. 4.13引物：用TE缓冲液或无菌去离子水配置成10umol/L 一20℃保存；扩增大小为516bp.引物序 1 ...
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