BJS 201916 食品中大黄酚和橙黄决明素的测定.pdf

附件1 食品中大黄酚和橙黄决明素的测定 BJS201916 1范围 本方法规定了食品（含保健食品）中大黄酚和橙黄决明素的高效液相色谱测定方法. 本方法适用于饮料、代用茶等食品及片剂、胶囊、颗粒剂、口服液等剂型的保健食品 中大黄酚和橙黄决明素的含量测定. 2原理 试样经甲醇回流提取后，再以稀盐酸水解，二氯甲烷萃取，采用配有二极管阵列检测 器或紫外检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量. 3试剂和材料 除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CH3OH):色谱纯. 3.1.2乙腈(C2H3N):色谱纯. 3.1.3磷酸(H3PO4). 3.1.4二氯甲烷(CH2CL2). 3.1.5盐酸(HCL). 3.1.6无水乙醇(CH3CH2OH). 3.1.7乙酸乙酯(C4H8O2). 3.1.8甲酸(CH2O2). 3.2试剂配制 3.2.1磷酸水溶液(0.1%)：取磷酸(3.1.3)1.0mL 加水定容至1000mL. 3.2.2稀盐酸：取盐酸(3.1.5)234mL 用水溶解并定容至1000mL. 3.2.3无水乙醇-乙酸乙酯(21)混合溶液：取无水乙醇500mL与乙酸乙酯250mL 混匀. 3.2.4甲酸水溶液(0.1%)：取甲酸(3.1.8)1.0mL 加水稀释并定容至1000mL. 3.3标准品 橙黄决明素、大黄酚的标准品的分子式、相对分子量、CAS登录号见附录A表A.. 橙黄决明素的纯度≥98%，大黄酚的纯度≥99%. 3.4标准溶液配制 3.4.1 标准储备液(100ug/mL):分别称取大黄酚、橙黄决明素(3.3)各0.0100g(精确至0.0001g ) 置100mL棕色量瓶中，用无水乙醇- 乙酸乙酯(21)混合溶液(3.2.3)溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100μg/mL的标 准储备液，0~4℃冷藏保存，有效期6个月. 3.4.2混合标准中间液(20μg/mL):分别准确吸取大黄酚、橙黄决明素标准储备液(100ug mL)(3.4.1)各5mL 置同一25mL棕色量瓶中，用无水乙醇- 乙酸乙酯(21)混合溶液(3.2.3)稀释至刻度，摇匀.0~4℃冷藏保存，有效期1个月. 3.4.3 混合标准工作液：分别准确吸取不同体积的混合标准中间液，用无水乙醇- 乙酸乙酯(21)混合溶液(3.2.3)稀释成一系列标准工作液，该标准系列中大黄酚和橙 黄决明素浓度为0.2ug/mL、0.5ug/mL、2.0ug/mL、4.0ug/mL、10.0ug/mL 、20.0ug/mL.临用新制. 4仪器和设备 2 4.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器或紫外检测器. 4.2超声波清洗器. 4.3高速万能粉碎机. 4.4分析天平：感量分别为0.01g和0.01mg. 4.5电热恒温水浴锅. 4.6旋转蒸发仪. 4.7氮吹仪. 5分析步骤 5.1试样制备 5.1.1固态试样或半固态试样 取适量固态试样（代用茶及片剂、胶囊内容物、颗粒剂等保健食品）混匀，研细，或 取适量半固态试样（软胶囊内容物）混匀，称取0.5g~1g(精确至0.001g) 置平底烧瓶 中，加入甲醇50mL 混匀，称定重量，加热回流1h 放冷，再称定重量，用甲醇补足减 失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25mL于平底烧瓶中，蒸干（或氮吹至干），加 入稀盐酸(3.2.2)30mL 超声2min 加热回流水解1h 立即冷却，置于分液漏斗中，先 用少量水洗涤烧瓶，再用少量二氯甲烷洗涤烧瓶，并入分液漏斗中，酸液再用二氯甲烷振...