BJS 202001 小麦粉中三聚硫氰酸三钠盐的测定.pdf

附件1 小麦粉中三聚硫氰酸三钠盐的测定 BJS202001 1范围 本方法规定了小麦粉中三聚硫氰酸三钠盐的高效液相色谱测定方法. 本方法适用于小麦粉中三聚硫氰酸三钠盐的测定. 2原理 样品用甲醇提取，采用高效液相色谱- 二极管阵列检测器测定，外标法定量.试样中检出三聚硫氰酸三钠盐后采用液相色谱- 质谱/质谱法进行确证. 3试剂与试药 除非另有说明，本方法试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CH3OH):色谱纯. 3.1.2磷酸二氢钾(KH2PO4). 3.1.3磷酸(H3PO4). 3.1.4甲酸铵(HCOONH4):色谱纯. 3.1.5甲酸(HCOOH):色谱纯. 3.2试剂配制 3.2.1 磷酸盐缓冲溶液(20mmol/L):称取磷酸二氢钾2.72g(3.1.2)(精确至0.001 g) 加水800mL完全溶解后，用磷酸(3.1.3)调节pH在3.7±0.2之间，用水稀释至1000mL. 3.2.2 甲酸铵溶液(5 mmol/L):称取甲酸铵0.26 g(3.1.4)(精确至0.001 g) 加水800mL完全溶解后，用甲酸(3.1.5)调节pH在3.5±0.2之间，用水稀释至1000mL. 3.3标准品 三聚硫氰酸三钠盐：纯度不低于98%的标准品或经国家认证并发布的有证标准物质.其中文名 称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式见附录A. 3.4标准溶液配制 3.4.1 标准储备液(100 μg/mL):准确称取三聚硫氰酸三钠盐标准品10 mg(精确至0.01mg) 置于100 mL容量瓶中，甲醇溶解并定容，混匀，得到浓度为100 μg/mL的标准储备液.-18℃避光保存，有效期30天. 3.4.2 标准工作溶液(10 μg/mL):准确吸取标准储备液(3.4.1)5.0 mL于50 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，混匀，得到标准工作溶液.-18℃避光保存，有效期30天. 3.4.3标准系列工作液：准确吸取标准工作液(3.4.2)0.25mL、0.50mL、1.0mL、2.5mL、5.0 mL和10.0 mL于50 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，混匀，得到标准系列工作液.浓度分别为0.050 μg/mL、0.10 4g/mL、0.20ug/mL、0.50g/mL、1.0μg/mL和2.0ug/mL.现用现配. 4仪器和设备 4.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器. 4.2电子天平：感量分别为1mg和0.01mg. 4.3涡旋混合器：转速不低于3000r/min. 4.4高速冷冻离心机：转速不低于8000r/min. 4.5pH计：精确至0.01. 4.6往复式振荡器. 1 4.7滤膜：有机相，孔径0.22um. 5分析步骤 5.1样品前处理 5.1.1试样制备 称取具代表性小麦粉样品约200g 混合均匀，贮存于洁净广口容器中，干燥避光保存备用. 5.1.2试样处理 称取4g试样（精确至0.001g) 置于50mL具塞离心管中，准确加入甲醇(3.1.1）20 mL 涡旋3 min 振荡提取10 min 在4 ℃下8000 r/min离心2 min 转移上清液至另一离心管中，残渣再加甲醇20mL 重复提取1次，合并上清液，涡旋混匀后 过0.22μm有机相滤膜(4.7)，弃去2~5滴初滤液，取续滤液作为待测试样液. 5.2仪器分析参考条件 a)色谱柱：C18色谱柱(4.6mmx150mm 5um)或性能相当者. b)流动相：A为20 mmol/L KH2PO4缓冲溶液(3.2.1)...