ICs11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T27537-2011 动物流感检测A型流感病毒分型基因 芯片检测操作规程 Animal influenza detection-Protocol of DNA microarray examination for influenza A virus subtypes 2011-11-21发布 2012-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T27537-2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草, 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口, 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中国人民解放军军事医学科学院、中国兽医药品监 察所. 本标准主要起草人:韩雪清、刘伯华、李建、林祥梅、王薏煜、刘建、陈茹、侯义宏、刘业兵、贾广乐、 吴绍强、梁成珠、秦智锋、宁宜宝、薄清如、王伊琴. GB/T27537-2011 动物流感检测A型流感病毒分型基因 芯片检测操作规程 1范围 本标准规定了A型流感病毒分型基因芯片检测的操作规程. 本标准适用于口岸样品中A型流感病毒全部亚型(H1~H16 N1~N9)的筛查. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. ctr1、ctr2和ctr3:质控探针1、2和3(control1、control2 and control3) DEPC:焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate) dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate) PBS:磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffer solution) RNA:核糖核酸(ribonucleic acid) RT-PCR:反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction) SDS:十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate) SSC:氯化钠/柠檬酸钠缓冲液(sodium chloride-sodium citrate buffer) TAMRA:羧基四甲基若丹明(carboxytetramethylrhodamine) 4主要试剂和仪器 4.1主要试剂 4.1.1试验用水 蒸馏水,按照GB/T6682 三级用水,除另有规定外,所用生化试剂均为分析纯. 4.1.2提取试剂 Trizol试剂等或商品化的病毒RNA提取试剂, 4.1.3A型流感病毒多重不对称RT-PCR扩增引物和探针的合成 特异性引物和探针(参见附录A).探针和引物合成后,采用无RNA酶的水(参见附录B)分别溶解 为50μmol 一20℃保存备用. 1 ...
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