ICS11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T27981-2011 牛传染性鼻气管炎病毒实时 荧光PCR检测方法 Real-time PCR method for the detection of infectious bovine rhinotracheitis virus 2011-12-30发布 2012-06-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T27981—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准参考了OIE发布的《陆生动物诊断试验和疫苗手册》(2008版)关于牛传染性鼻气管炎/牛传 染性化脓性外阴阴道炎(Chapter2.4 13)的内容. 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检 疫局. 本标准主要起草人：陈茹、刘中勇、林志雄、罗琼、曾碧健、许如苏、姜焱、吴晓薇. GB/T27981-2011 牛传染性鼻气管炎病毒实时 荧光PCR检测方法 1范围 本标准规定了牛传染性鼻气管炎病毒（牛疱疹病毒I型，BoHV-1)实时荧光PCR检测方法的技术 要求. 本标准适用于快速检测牛血样、拭子、精液、动物组织（粘膜、肝、脾、肾、淋巴结、胎盘组织等）和细胞 培养物等样品中BoHV-1病毒感染. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 世界动物卫生组织(OIE)《陆生动物诊断试验和疫苗标准手册》(2008版)关于检测牛冷冻精液 中BoHV-1病毒的实时荧光PCR方法 3缩路语 下列缩略语适用于本文件. BoHV-l:bovine herpesvirus type 1 牛疱疹病毒I型. Ct值：荧光信号量达到设定的值时所经历的循环数. DNA:deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸. DTT:DL-dithiothreitol 二硫苏糖醇. EDTA:ethylene diaminetetraacetic acid 乙二胺四乙酸. IBR:bovine infectious rhinotracheitis 牛传染性鼻气管炎. PBS:phosphate buffer solution 磷酸盐缓冲生理盐水. PCR:polymerase chain reaction 聚合酶链式反应. SDS:sodium dodecyl sulfate 十二烷基磺酸钠. UDG酶：uracil DNA glycosylase 尿嘧啶DNA糖基化酶. 4设备和器材 4、1荧光PCR仪. 4.2台式冷冻离心机. 4.3可调微量移液器：规格10L、100μL、200gL、1mL. 4.4带滤芯微量吸头：规格10μL、100μL、200μL、1mL. 4.5PCR光学反应管. 4.6微量离心管. 4.7涡旋混匀器. 4.8恒温培养箱. 4.9冰箱：规格2℃~8℃，-20℃，-80℃. ...
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