KJ 食品快速检测方法 KJ202102 水产品中组胺的快速检测 2021-01-13发布 国家市场监督管理总局发布 KJ202102 水产品中组胺的快速检测 1范围 本方法规定了水产品中组胺的快速检测方法. 本方法适用于水产品（鱼类等）中组胺的快速测定. 第一法胶体金免疫层析法 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理，样品中的组胺经提取（或提取衍生）后与胶体金标记的特异性 抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线(T线)上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化.通过检 测线(T线)与控制线(C线)颜色深浅比较，对样品中组胺进行定性判定. 3试剂与材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1无水乙醇(C2H5OH). 3.1.2无水四氢呋喃(CHgO) 3.1.34-硝基苯甲酰氯(C HC1NO) 3.1.4三羟甲基氨基甲烷(C4HNO3) 即Tris. 3.1.5盐酸(HC1 37%). 3.2试剂配制 3.2.170%乙醇溶液（体积分数）：量取乙醇(3.1.1)700mL 加水至1000mL 混合均匀. 3.2.2样品提取液：称取12.1 g Tris(3.1.4) 加950mL70%乙醇(3.2.1)溶解，充分混匀后，用盐酸 (3.1.5)调节H值至8.5，用70%乙醇(3.2.1)定容至1000mL.或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专 用提取液. 3.2.3样品稀释液：称取12.1 g Tris(3.1.4) 加950mL水溶解，充分混匀后用盐酸(3.1.5)调节pH值 至7.0，用水定容至1000mL.或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用稀释液. 3.2.4样品衍生剂(100mg/mL):称取10g4-硝基苯甲酰氯(3.1.3)，加90mL无水四氢呋喃(3.1.2)溶 解，用无水四氢呋喃(3.1.2)定容至100mL.或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用衍生剂. 3.3参考物质 组胺参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥97.0%. 注：或等同可溯源物质. 1 KJ 202102 表1组胺参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 组胺 Histamine 51-45-6 C.H N3 111.15 3.4标准溶液配制 组胺标准溶液(4mg/mL):称取适量组胺参考物质(3.3)，准确至0.1mg 置于10mL容量瓶中，用 水溶解并定容至刻度线，混匀，配成浓度为4mg/mL的组胺标准溶液.在一20℃保存，有效期6个月. 注：组胺标准溶液的配制浓度以组胺单体计算，称取组胺参考物质时应进行折算.组胺参考物质：若为组胺 (CHN 相对分子质量111.15)，称取40mg;若为组胺盐酸盐(CsHN32HCl 相对分子质量184.07)，称取 66mg;若为组胺磷酸盐(CHN2HPOH2O 相对分子质量325.15)，称取117mg. 3.5材料 组胺胶体金免疫层析试剂盒：含胶体金检测卡及配套的试剂. 4仪器和设备 4.1电子天平：感量分别为0.01g和0.0001g. 4.2pH计. 4.3组织粉碎机. 4.4涡漩混合器. 4.5离心机：转速≥4000r/mina 4.6移液器：100pL、200gL、1mL和5mL 4.7读数仪（可选）：产品配套可使用的检测仪器. 5环境条件 5.1温度15℃~30℃. 5.2空气相对湿度≤80%. 6分析步骤 6.1试样制备 去头、骨、内脏、鱼皮，...
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