KJ 食品快速检测方法 KJ202103 食用植物油中天然辣椒素的快速检测 荧光免疫层析法 2021-05-31发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202103 食用植物油中天然辣椒素的快速检测 荧光免疫层析法 1范围 本方法规定了食用植物油中天然辣椒素的快速检测荧光免疫层析法. 本方法适用于菜籽油、大豆油、花生油、芝麻油、玉米油、葵花籽油、茶籽油、橄榄油、调和油等食用植 物油中天然辣椒素的快速测定. 2原理 试样中天然辣椒素与荧光标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和试纸条中检测线上抗原的结合，用 荧光速测仪测定荧光强度，荧光强度与试样中的天然辣椒素含量相关.根据荧光强度变化和内置曲线 自动计算试样中天然辣椒素含量，进行定性判定. 3试剂及材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，试验用水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂及材料 3.1.1甲醇(CHOH). 3.1.2二氯甲烷(CH2Cl2). 3.1.3石油醚：沸程60℃~90℃. 3.1.4氢氧化钠(NaOH). 3.1.5浓硫酸(H2SO4). 3.1.6pH试纸：1~14. 3.2溶液配制 3.2.1甲醇水(19)溶液：量取10mL甲醇(3.1.1)，加入到90mL水中，混匀备用. 3.2.2氢氧化钠溶液(0.5mol/L):称取20.0g氢氧化钠(3.1.4)，加入800mL水搅拌，待冷却至室温， 用水定容至1000mL. 3.2.3硫酸(114)溶液：量取10mL浓硫酸(3.1.5)，缓慢加入到140mL水中，混匀备用. 3.3参考物质 天然辣椒素(C1H27NO3 CAS号：404-86-4)：纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物质证书的标 准物质. 3.4标准溶液配制 3.4.1标准储备液(0.1mg/mL):准确称取10mg(精确至0.1mg)天然辣椒素标准品(3.3)，用甲醇 (3.1.1)溶解，配制成质量浓度为0.1mg/mL标准储备液.一20℃保存，有效期3个月. 1 KJ202103 3.4.2标准工作溶液(0.1μg/mL):准确移取100L标准储备液(3.4.1)于100mL容量瓶中，用甲醇 (3.1.1)定容至100mL 配制成浓度为0.1μg/mL的标准工作溶液.4℃保存，有效期1个月. 4仪器及设备 4.1荧光速测仪：可测定免疫试纸条的荧光强度，并显示食用植物油中天然辣椒素的测定结果. 4.2电子天平：感量分别为0.01g和0.1mg. 4.3涡漩混合器. 4.4孵育器：(37.0士1.0)℃. 4.5氮吹仪或空气吹干仪（带温度控制）. 4.6天然辣椒素荧光免疫层析试剂盒：荧光微孔（含荧光标记的特异性抗体）、试纸条.需在阴凉、干 燥、避光条件下保存. 4.7移液器：10pL、100L、1mL 4.8离心机：≥4000r/min. 5环境条件 环境温度：15℃~30℃；相对湿度：≤80%. 6分析步骤 6.1试样制备 室温条件下，取适量有代表性试样充分混匀. 6.2试样提取 准确称取试样2g(精确至0.01g) 置于15mL具塞离心管中，加入2mL二氯甲烷(3.1.2)，再加人 2mL0.5mol/L氢氧化钠溶液(3.2.2)，涡漩混匀2min 4000r/min离心2min 取上层水相1mL 用 硫酸溶液(3.2.3)调节pH至5~6（约0.15mL~0.25mL) 然后加入2mL石油醚(3.1.3）涡漩混匀 1min 取上清液1mL置于玻璃试管内，氮吹仪或空气吹干仪(4.5)60℃吹至近干，加人150uL10%甲 醇水(3.2.1)复溶，...
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