KJ 202105 水产品中地西泮残留的快速检测 胶体金免疫层析法.pdf

12H2O,Naz HPO4,免疫层析法,地西泮,其他规范
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KJ 食品快速检测方法 KJ202105 水产品中地西泮残留的快速检测 胶体金免疫层析法 2021-05-31发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202105 水产品中地西泮残留的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了水产品中地西泮胶体金免疫层析快速检测方法. 本方法适用于鱼、虾中地西泮的快速定性测定. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理.样品中地西泮经有机试剂提取,固相萃取柱净化,浓缩复溶 后,地西泮与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制抗体和检测卡中检测线(T线)上抗原的结合,从而导 致检测线颜色深浅的变化.通过检测线与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中地西泮进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CHOH). 3.1.2乙腈(CHCN). 3.1.3二水合磷酸二氢钠(NaH2PO42H2O). 3.1.4十二水合磷酸氢二钠(Naz HPO412H2O). 3.1.5氯化钠(NaC1). 3.1.6合成硅酸镁吸附剂(MgO3Si) 125m~500μm. 3.1.7石墨化碳黑吸附剂(GCB) 38μm~125m. 注:合成硅酸镁吸附剂和石墨化碳黑吸附剂,颗粒较细,谨防吸入. 3.2参考物质 地西泮参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1,纯度≥99%. 注:或等同可溯源物质. 表1地西泮参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 地西泮 Diazepam 439-14-5 Cs H CINO 284.74 3.3溶液配制 复溶溶液:磷酸盐缓冲液(10mmol/L) 称取8.0g氯化钠(3.1.5)、2.77g十二水合磷酸氢二钠 (3.1.4)、0.352g二水合磷酸二氢钠(3.1.3),用水溶解并定容至1L. 1 KJ202105 3.4标准溶液配制 3.4.1地西泮标准储备液(100g/mL):精密称取地西泮参考物质(3.2)10mg 精确至0.01mg 置于 小烧杯中,用甲醇(3.1.1)溶解,定量转移至100mL容量瓶中,再用甲醇(3.1.1)定容,摇匀,配制成 100μg/mL地西泮标准储备液,4℃冷藏避光保存,有效期6个月. 3.4.2地西泮标准中间液(1Kg/mL):精密量取地西泮标准储备液(3.4.1)500L加人50mL容量瓶 中,用甲醇(3.1.1)定容,摇匀,配制成1μg/mL地西泮标准中间液,4℃冷藏避光保存,有效期6个月. 3.4.3地西泮标准工作液(10ng/mL):精密量取地西泮标准中间液(3.4.2)500L加入50mL容量瓶 中,用甲醇(3.1.1)定容,摇匀,配制成10ng/mL地西泮标准工作液,临用现配. 3.4.4标准溶液为外部获取时,管理及使用应符合相关规定. 3.5材料 3.5.1地西泮胶体金免疫层析试剂盒:一般包含金标微孔、胶体金检测卡,适用于水产品,按产品要求 保存. 3.5.2固相萃取柱:固相萃取柱套筒(12mL体积)中塞入筛板,称取0.8g合成硅酸镁吸附剂(3.1.6)加 人柱内,使填料密实且表面水平,再塞人筛板压实,即完成固相萃取柱制备.若用于检测虾、黄鳝等含色 素的样品,则填料为0.8g合成硅酸镁吸附剂(3.1.6)、0.1g~0.2g石墨化碳黑吸附剂(3.1.7),混合均匀 加入柱内,使填料密实且表面水平,再塞入筛板压实,制成固相萃取柱.或者使用同类商品化固相萃 取柱. 4仪器和设备...

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