KJ 食品快速检测方法 KJ202206 花生及其制品中黄曲霉毒素B1的快速检测 胶体金免疫层析法 2022-12-05发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202206 花生及其制品中黄曲霉毒素B1的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了花生及其制品中黄曲霉毒素B1快速检测胶体金免疫层析法. 本方法适用于花生、水煮花生、烘烤花生、油炸花生和花生酱中黄曲霉毒素的快速定性测定. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理,样品中的黄曲霉毒素1经提取与胶体金标记的特异性抗体结 合,抑制了抗体和试纸条中检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线(T线)颜色深浅的变化.通过 检测线(T线)与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中黄曲霉毒素B1进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1乙腈(C2H3N). 3.1.2无水乙醇(C2HgO). 3.1.3盐酸(HC1). 3.1.4三羟甲基氨基甲烷(C4HNO3 Tris). 3.1.5氯化钠(NaC1). 3.2试剂配制 3.2.1乙醇-水溶液(11):分别量取50mL无水乙醇(3.1.2)、50mL水,混匀. 3.2.2盐酸溶液(11):量取50mL盐酸(3.1.3)缓慢倒人50mL水中,混匀. 3.2.3样品稀释液:称取121.14gTis(3.1.4) 加入600mL.水,充分搅拌溶解后用盐酸溶液(3.2.2)调 节H至8.5,向溶液中加人10g氯化钠(3.1.5),充分搅拌至溶解,加水定容至1L.或使用胶体金免疫 层析检测试剂盒配套的稀释液. 3.3标准品 黄曲毒毒素B1标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1,纯度≥98%. 注:或等同可溯源物质. 表1黄曲霉毒素B 标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 黄曲霉毒素B1 Aflatoxin B 1162-65-8 C: 312.27 1 KJ202206 3.4标准溶液配制 3.4.1黄曲霉毒素B1标准储备液(100g/mL):准确称取2.5mg(精确至0.01mg)黄曲霉毒素B1标 准品于烧杯中,用乙腈(3.1.1)溶解后转移至25mL容量瓶中,用乙腈(3.1.1)稀释至刻度,摇匀.一20 ℃避光保存,有效期3个月. 3.4.2黄曲霉毒素B1标准工作液(1g/mL):准确量取黄曲霉毒素B1标准储备液(100μg/mL) (3.4.1)1mL 置于100mL容量瓶中,用乙腈(3.1.1)稀释至刻度,摇匀.一20℃避光保存,有效期3 个月. 3.5材料 黄曲霉毒素1胶体金免疫层析试剂盒:一般包含金标微孔、胶体金试纸条及配套的试剂. 4仪器和设备 4.1电子天平:感量分别为0.01g和0.01mg. 4.2组织捣碎机. 4.3涡旋混合器. 4.4pH计. 4.5离心机:转速≥4000r/min. 4.6移液器:100L、200gL、1mL、5mL. 4.7胶体金读数仪(可选). 5环境条件 温度:15℃~40℃;湿度:≤80%. 6分析步骤 6.1试样制备 6.1.1花生、水煮花生、烘烤花生、油炸花生 取具有代表性样品约1kg 用组织捣碎机将其充分粉碎,混合均匀后缩分至100g 储存于样品瓶 中,密封保存,供检测用. 6.1.2花生酱 取代表性样品约1kg 对于袋装、瓶装等包装样品需至少采集3个包装(同一批次或号),用组织捣 碎机混合均匀,储存于样品瓶中,密封保...
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