KJ 食品快速检测方法 KJ202207 乳及乳制品中地塞米松的快速检测 胶体金免疫层析法 2022-12-05发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202207 乳及乳制品中地塞米松的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了乳及乳制品中地塞米松快速检测胶体金免疫层析法. 本方法适用于生牛乳、巴氏杀菌牛乳和脱脂巴氏杀菌牛乳中地塞米松的快速定性测定. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理,样品中的地塞米松与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制了抗 体和试纸条中检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线(T线)颜色深浅的变化.通过检测线(T 线)与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中地塞米松进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CHOH). 3.1.2十二水合磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O). 3.1.3二水合磷酸二氢钠(NaH2PO42H2O). 3.2试剂配制 3.2.1磷酸氢二钠溶液(0.2mol/L):称取71.6g十二水合磷酸氢二钠(3.1.2),加适量水溶解后定容至1L. 3.2.2磷酸二氢钠溶液(0.2mol/L):称取31.2g二水合磷酸二氢钠(3.1.3),加适量水溶解后定容至1L. 3.2.3PBS缓冲溶液A(0.2mol/L pH=7.4):量取磷酸二氢钠溶液(3.2.2)19.0mL 加入0.2mol/L 的磷酸氢二钠溶液(3.2.1)81.0mL 混匀. 3.2.4PBS缓冲溶液B(0.01mol/L PH=7.4):量取50.0 mL PBS缓冲溶液(3.2.3),加水至约 800mL 用盐酸溶液调pH至7.4,用水稀释至1L. 3.3标准品 地塞米松标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1,纯度≥99%. 注:或等同可溯源物质. 表1地塞米松的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 地塞米松 Dexamethasone 50-02-2 392.46 1 KJ202207 3.4标准溶液配制 3.4.1地塞米松标准储备液(1.0mg/mL):准确称取10mg地塞米松标准品(精确至0.01mg) (3.3) 用甲醇(3.1.1)溶解并定容至10mL 摇匀.一20℃保存,有效期3个月. 3.4.2地塞米松标准中间液(10g/mL):准确移取地塞米松标准储备液(1.0mg/mL)(3.4.1)1mL 置 于100L容量瓶中,用甲醇(3.1.1)定容至刻度,摇匀.一20℃保存,有效期1个月. 3.4.3地塞米松标准工作液(0.1ug/mL):准确移取地塞米松标准中间液(3.4.2)1mL 置于100mL容 量瓶中,用PBS缓冲溶液B(3.2.4)定容至刻度,摇匀,临用现配. 3.5材料 地塞米松胶体金免疫层析试剂盒:一般包含金标微孔、胶体金试纸条或检测卡及配套的试剂. 4仪器和设备 4.1电子天平:感量分别为0.01g和0.01mg. 4.2涡旋混合器. 4.3温育器. 4.4pH计. 4.5移液器:10gL、200gL、1mLo 4.6胶体金读数仪(可选). 5环境条件 温度:10℃~35℃;湿度:≤80%. 6分析步骤 6.1试样制备 取250g左右均匀试样装入洁净容器中作为测定用试样,4℃下密封保存. 6.2测定步骤 吸取200uL试样于金标微孔中,上下抽吸至孔底颗粒完全溶解,40℃温育条件下孵育6min.将 试纸条样品端垂直向...