KJ 食品快速检测方法 KJ202208 蔬菜水果中丙溴磷的快速检测 胶体金免疫层析法 2022-12-05发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202208 蔬菜水果中丙溴磷的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了蔬菜水果中丙溴磷残留的胶体金免疫层析快速检测方法. 本方法适用于蔬菜(结球甘蓝、萝卜、芥蓝、花椰菜、辣椒、普通白菜、番茄)、水果(芒果、柑、橙、橘、山 竹)中丙溴磷残留量的快速定性检测. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理.样品中的丙溴磷经提取后与胶体金标记的特异性抗体结 合,抑制抗体和试纸条中检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线(T线)颜色深浅的变化.通过检 测线(T线)与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品是否检出丙溴磷进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CH3OH). 3.1.2氯化钠(NaC1). 3.1.3十二水合磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O). 3.1.4二水合磷酸二氢钠(NaH2PO2H2O). 3.2试剂配制 缓冲液(0.1mmol/1.磷酸盐缓冲溶液,PH为8.0):准确称取氯化钠(3.1.2)9g、十二水合磷酸氢二 钠(3.1.3)6g、二水合磷酸二氢钠(3.1.4)0.4g 用水溶解并定容至100mL 即为缓冲液.或使用胶体金 免疫层析检测试剂盒专用缓冲液. 3.3参考物质 丙溴磷(Profenofos)参考物质,CAS号:41198-08-7,纯度≥94%,或等同可溯源物质. 3.4标准溶液配制 3.4.1丙溴磷标准储备液(100ug/mL):准确称取适量经纯度折算后的丙溴磷参考物质10mg(精确至 0.01mg) 置于小烧杯中,用甲醇(3.1.1)溶解,转移至100mL容量瓶中,再用甲醇(3.1.1)定容,摇匀,配 制成100μg/mL丙溴磷标准储备液,一18℃以下避光保存,有效期6个月. 3.4.2丙溴磷标准工作液(10ug/mL):精密移取丙溴磷标准储备液(3.4.1)5mL加人50mL容量瓶 中,用甲醇(3.1.1)定容,摇匀,配制成10μg/mL丙溴磷标准工作液,4℃冷藏避光保存,有效期1个月. 1 KJ 202208 3.5材料 3.5.1丙溴磷胶体金免疫层析试剂盒:一般包含金标微孔(含胶体金标记的特异性抗体)、胶体金检测 卡等. 3.5.250mL.容量瓶. 3.5.3一次性吸管. 4仪器和设备 4.1电子天平:感量分别为0.01mg和0.01g. 4.2移液器:100L、200gL、1mL、5mL 4.3粉碎机. 4.4离心机:转速≥4000r/min. 4.5涡旋混合器. 4.6温育器. 4.7胶体金读数仪(可选). 5环境条件 温度20℃~40℃. 6分析步骤 6.1试样制备 6.1.1蔬菜类试样制备 称取约100g具有代表性的蔬菜样品,叶菜类蔬菜取整棵(去除根),根茎类蔬菜取整棵(去除顶部 叶及叶柄),芸薹属类蔬菜取整棵(花椰菜去除叶、芥蓝去除根),茄果类取全果(去柄).叶菜类蔬菜剪 碎,其他样品匀浆处理,分为两份分别装入洁净容器作为试样和留样,密封,标记.留样置于一18℃以 下保存. 6.1.2水果类试样制备 称取约100g具有代表性的水果样品,柑橘类水果取全果(去柄),芒果取全果(去除核),山竹取全 果(测定果肉),匀浆处理,分为两份分别装入洁净容器作为试样和留样,密封,标记.留样置于一18℃ 以下保存. 6.2试样提取 准确称取制备好的试样2g(精确至0.1...
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