KJ 食品快速检测方法 KJ202302 动物肌肉组织中链霉素和庆大霉素的 快速检测胶体金免疫层析法 2023-06-13发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202302 动物肌肉组织中链霉素和庆大霉素的 快速检测胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了动物肌肉组织中链霉素(以链霉素和双氢链霉素之和计)、庆大霉素的胶体金免疫层 析快速检测方法. 本方法适用于猪肉、牛肉、鸡肉、羊肉等动物肌肉组织中链霉素的快速测定,适用于猪肉、牛肉、鸡 肉、火鸡肉等动物肌肉组织中庆大霉素的快速测定. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理.样品中的链霉素、双氢链霉素和庆大霉素经提取后与胶体金 标记的特异性抗体结合,抑制抗体和检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化.通 过检测线与控制线(线)颜色深浅比较,对样品中链霉素和双氢链霉素总量、庆大霉素进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1三羟甲基氨基甲烷(C.HNOa) 即Tris碱. 3.1.2盐酸(HC1 37%). 3.2试剂配制 3.2.1盐酸溶液(2mol/L):量取盐酸(3.1.2)16.7mL 用水稀释至100mL 混匀,冷却待用. 3.2.2缓冲液(pH8.5 0.1mol/L):称取12.1 g Tris碱(3.1.1),加约950mL水溶解,混匀,用盐酸溶液 (3.2.1)调节pH至8.5,用水定容至1L. 3.3参考物质 链毒素、庆大霉素参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1,纯度均 ≥98%. 注:或等同可溯源物质. KJ 202302 表1参考物质信息 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 硫酸链霉素 Streptomycin sulfate 3810-74-0 C21HN O121.5H2SO4 728.69 硫酸双氢链霉素 Dihydrostretomycin sulfate 5490-27-7 C21H41NO121.5H2SO4 730.71 C1:C2HNO2H2SO C1:575.68 硫酸庆大霉素 Gentamycin sulfate 1405-41-0 C1a:C1HNO2H2SO C1a:547.62 C2:C2oHNO HgSO C2:561.65 3.4标准溶液配制 3.4.1链霉素标准储备液(100ug/mL 以链霉素计):准确称取硫酸链霉素参考物质(3.3)12.5mg 精 确至0.01mg 用水溶解后,移入100mL容量瓶,定容至刻度,摇匀,配制成浓度为100g/mL的链霉 素标准储备液.4℃避光保存,有效期6个月. 3.4.2链霉素标准工作液(10g/mL):吸取链霉素标准储备液(100μg/mL)(3.4.1)1mL 置于10mL 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,配制成浓度为10g/mL的链霉素标准工作液.4℃避光保存,有效 期1个月. 3.4.3庆大霉素标准储备液(100ug/mL 以庆大霉素计):准确称取适量硫酸庆大霉素参考物质(3.3), 用水溶解后,移入100mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀,配制成质量浓度为100pg/mL的庆大霉素标准 储备液.4℃避光保存,有效期6个月. 3.4.4庆大霉素标准工作液(10μg/mL):吸取庆大霉素标准储备液(100μg/mL)(3.4.3)1mL 置于 10mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,配制成浓度为10g/mL的庆大霉素标准工作液.4℃避光 保存,有效期1个月...