ICS65.020.30 B43 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T1900-2010 畜禽细胞与胚胎冷冻保种技术规范 Procedures for cell and embryo cryopreservation of domestic animals 2010-07-08发布 2010-09-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T1900—2010 畜禽细胞与胚胎冷冻保种技术规范 1范围 本标准规定了用于保种的家畜精液、家畜卵母细胞、家畜胚胎和畜禽成纤维细胞冷冻保存技术要 求. 本标准适用于家畜精液、家畜卵母细胞、家畜胚胎和畜禽成纤维细胞等遗传物质冷冻保存和检验入 库. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB4143牛冷冻精液 GB20557山羊冷冻精液 NY/T1234牛冷冻精液生产技术规程 NY/T1674牛羊胚胎质量检测技术规程 3术语及定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 超低温保存cryopreservation 在液氨中冷冻保存遗传物质的技术. 3.2 卵母细胞oocyte 来源于有腔卵泡具有繁殖能力的细胞. 3.3 成纤维细胞fibroblast 以畜禽组织或胎儿为材料,体外培养、分离出的梭形或不规则形细胞.胞质近中央处有椭圆形胞 核,胞体一般铺展很开,细胞之间排列疏松:有较大细胞间隙. 3.4 供体donor 提供精液、卵母细胞、成纤维细胞或胚胎的个体. 4细胞冷冻保存 4.1家畜精液冷冻保存 4.1.1数量 每个品种保存精液不少于3000剂(猪0.5L细管不少于30000剂),每个品种公畜不少于10头, 每个个体保存冻精不少于300剂. 4.1.2供体 符合其品种特性、特征;三代以内无亲缘关系,系谱清楚;健康、无传染性疾病、遗传疾病;有检疫证 1 NY/T1900-2010 明. 4.1.3剂型 牛、羊、鹿、犬0.25mL细管;马、驴0.5mL细管;猪0.5mL细管或5mL细管. 4.1.4标记 标明生产单位、品种、供体号和生产日期. 4.1.5精液冷冻 牛冷冻精液制作应按NY/T1234的规定执行;山羊和绵羊冷冻精液制作按GB20557的规定执 行;其他家畜精液冷冻程序参照NY/T1234和GB20557的规定执行;不同家畜精液冷冻稀释液配方见 附录B. 4.1.6质量检测 牛冷冻精液质量检测按GB4143的规定执行;山羊冷冻精液质量检测按GB20557的规定执行;其 他家畜冷冻精液的质量检测按GB4143的规定执行,具体指标要求见附录C. 4.2卵母细胞冷冻保存 4.2.1数量 每个品种保存卵母细胞不少于1000个,牛和绵羊每个品种母畜不少于50头,每个个体保存卵母细 胞不少于20个;其他家畜每个品种母畜不少于35头,每个个体保存卵母细胞不少于30个. 4.2.2供体 供体要求同4.1.2. 4.2.3剂型 0.25mL细管,每支含卵母细胞不多于10个;OPS玻璃化冷冻每剂不多于5个. 4.2.4标记 标记要求同4.1.4. 4.2.5卵母细胞的采集与冷冻 卵母细胞的采集与冷冻参照附录D. 4.2.6质量检测 卵母细胞冷冻一解冻后达到Λ级或B级. 4.3成纤维细胞冷冻保存 4.3.1数量 公畜禽不少于10头(只),母畜禽不少于25头(只),每个个体体外培养第3~4代细胞6管,细胞密 度为1X105个/mL~5X105个/mL. 4.3.2供体 供体要求同4....