ICS65.120 B46 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T1902-2010 饲料中单核细胞增生 李斯特氏菌的微生物学检验 Microbiological examination of Listeria monocytogenes in feeds 2010-07-08发布 2010-09-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T1902-2010 饲料中单核细胞增生李斯特氏菌的微生物学检验 1范围 本标准规定了单核细胞增生李斯特氏菌的微生物学检验方法. 本标准适用于对饲料中单核细胞增生李斯特氏菌的分离、鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修订单）适用于本文件. GB/T14699.1饲料采样(ISO6497 Animal feeding stuffs-Sampling IDT) 3仪器与设备 除微生物实验室常规无菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 3.1冰箱. 3.2恒温培养箱：30℃1℃、36℃士1℃. 3.3均质器. 3.4显微镜：目镜10×，物镜10X~100×. 3.5电子天平：感量0.1g. 3.6锥形瓶：100mL、500mL 3.7平皿：直径90mm. 3.8试管：16mm×160mm. 3.9吸管：1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度). 4培养基和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水应符合二级用水的规定. 4.1增菌肉汤(LB1、LB2):见附录A第A1章. 4.2 PALCAM琼脂：见附录A第A.2章. 4.3OXA琼脂：见附录A第A.3章. 4.4科玛嘉李斯特氏菌显色琼脂. 注：由法国科玛嘉公司提供的产品的商品名.给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认 可.如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品. 4.5含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE):见附录A第A.4章. 4.6革兰氏染色液：见附录A第A.5章. 4.7SIM动力培养基：见附录A第A.6章. 4.8羊血琼脂：见附录A第A.7章. 4.9含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE):见附录A第A.8章. 4.10缓冲葡萄糖蛋白脉水(MR和VP试验用)：见附录A第A.9章. 4.11糖发酵培养基：见附录A第A.10章. 1 NY/T1902-2010 4.12过氧化氢酶试验：见附录A第A.11章. 4.13单核细胞增生李斯特氏菌和阴性对照标准株，如英诺克李斯特氏菌(L innocua)和伊氏李斯特氏 菌(L.noii) 4.14API李斯特氏菌鉴定系统. 注：由法国生物梅里埃公司提供的产品的商品名.给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的 认可.如果其他等效产品其有相同的效果，则可使用这些等效的产品. 5采样 采样数量和方式按GB/T14699.1执行（采样工具必须是灭菌的）.包装为袋、瓶和罐装的样品，应 从完整的未开封的包装中采取.固体样品应边取边混和；液态样品应通过振摇混匀.采集的试样密封 后，应尽快送到微生物检验室，一般应不超过3h.如果时间过长，可将试样于0℃~5℃中保存. 6试样的制备 超过1mm孔径筛的样品需要研磨，研体必须事先灭菌.制备的试样要在密闭瓶中低温保存.饲 料试样若不能及时检验，应置于4℃冰箱保存，在24h之内检验. 7操作步骤 7.1增菌 以无菌操作称取试样25g(或25mL)加入到含有225mLLB1增菌...
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