ICS67.200.10 B21 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2004-2011 大豆及制品中磷脂组分和含量的测定 高效液相色谱法 Determination of phospholipids in soybean and soybean products- HPLC 2011-09-01发布 2011-12-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2004-2011 大豆及制品中磷脂组分和含量的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了高效液相色谱法测定大豆及制品中磷脂组分和含量的方法. 本标准适用于大豆及制品（豆腐、豆浆、腐乳等）中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定. 本标准磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇线性范围分别为50μg/mL~4000μg/mL、 100g/mL~4000ug/mL、150μg/mL~4000μg/mL 本标准磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇检出限分别为：10ug/mL、30μg/mL、50μg/mL. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB5491粮食、油料检验扦样、分样法 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试料中的磷脂用氯仿一甲醇混合液提取，经氨基硅胶固相萃取柱纯化后，高效液相色谱分离，外标 法定量. 4试剂 除非另有说明，均使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水. 4.1氯仿(CHC13). 4.2乙酸(CHCOOH). 4.3乙醚(CH3CH2OCH2CHa). 4.4甲醇(CH3OH) 色谱纯. 4.5正已烷(CHCH2CH2CH2CH2CHg) 色谱纯. 4.6异丙醇(CH3 CHOHCHa) 色谱纯. 4.7氯仿一甲醇混合溶液(21)：取氯仿(4.1)和甲醇(4.4)混合. 4.8氯化钠溶液(14.6g/L):称取14.6g氯化钠(NaCl)加水溶解定容到1000mL. 4.9氯化钙溶液(1.0g/L.):称取1.0g无水氯化钙(CaCle)加水溶解定容到1000mL. 4.10生理盐水(11)：取氯化钠溶液(4.8)50mL和氯化钙溶液(4.9)50mL混合. 4.11氯仿一异丙醇混合溶液(21)：取氯仿(4.1)40mL和异丙醇(4.6)20mL混合. 4.12乙酸-乙醚混合溶液(2144)：取乙酸(4.2)2mL和乙醚(4.3)144mL混合. 4.13正己烷一异丙醇混合溶液(11)：取正已烷(4.5)50mL和异丙醇(4.6)50mL混合. 4.14磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇标准品：纯度>95%. 4.15磷脂标准储备溶液 1 NY/T2004-2011 分别称取磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇50mg(精确至0.1mg) 溶解在5.0mL的正己 烷一异丙醇混合溶液(4.13)中得到磷脂酰胆碱质量浓度约为10mg/mL、磷脂酰乙醇胺质量浓度约为 10mg/mL和磷脂酰肌醇质量浓度约为10mg/mL的标准储备溶液.该标准储备溶液在4℃下，可以稳 定储藏3个月. 4.16磷脂标准工作溶液 分别取上述不同体积磷脂标准储备溶液，分别用正己烷一异丙醇混合溶液(4.13)稀释，获得不同浓 度的磷脂工作标准溶液，其中磷脂酰胆碱的工作标准溶液质量浓度为50ug/mL、250μg/mL、800g/ mL、1000ug/mL和4000ug/mL;磷脂酰乙醇胺的工作标准溶液质量浓度为100...
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