NY/T 2008-2011 万寿菊及其制品中叶黄素的测定 高效液相色谱法.pdf

万寿菊,叶黄素,色谱法,其他规范
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ICS65.020 .B15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2008-2011 万寿菊及其制品中叶黄素的测定 高效液相色谱法 Determination of lutein in marigold raw material and its derived product by high performance liquid chromatography 2011-09-01发布 2011-12-01实施 中华人民共和国农业部 6发布 NY/T2008-2011 万寿菊及其制品中叶黄素的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了万寿菊及其制品中叶黄素的高效液相色谱测定方法. 本标准适用于万寿菊及其制品中叶黄素的测定. 本标准方法的定量测定范围为0.1mg/100g~250mg/100g 本标准方法的定量限为0.1mg/100 g 本标准方法的仪器检出限为0.02mg/100g. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3原理 试样在碱性条件下加热水解,使各种叶黄素酯完全水解为游离叶黄素,二氯甲烷萃取,用具紫外/可 见波长检测器(UV/VIS)的高效液相色谱检测,外标法定量. 4试剂和材料 除另有说明外,使用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水. 4.1氢氧化钠(NaOH). 4.2异丙醇(CHgO). 4.3二氯甲烷(CH2C12). 4.4氢氧化钠溶液[c(NaOH)=4.0mol/L]:称取16.0g氢氧化钠,加水溶解并稀释至100mL. 4.5无水硫酸钠(NaSO). 4.6叶黄素标准品(C40H02):纯度≥95%. 4.7叶黄素标准储备液:准确称取叶黄素标准品0.01g(准确至0.1mg)置于10mL烧杯中,加二氯甲 烷(4.3)溶解,转移到10mL棕色容量瓶中,用二氯甲烷定容至刻度,配制成质量浓度为1000mg/L的 标准储备液.该贮备液在一18℃避光条件下,可稳定储藏2个月. 4.8叶黄素标准工作液:根据试样中叶黄素的含量,准确吸取适量的标准储备液,用二氯甲烷(4.3)稀 释为质量浓度分别为0.5mg/L、2.5mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、25.0mg/L或者25.0mg/L、 100.0mg/L、250.0mg/L的标准工作液.该标准工作液4℃避光条件下,可稳定储藏3d. 5仪器设备 5.1高效液相色谱仪:带紫外/可见波长检测器(UV/VIS). 5.2分析天平:感量0.1mg和0.01g. NY/T2008-2011 5.3旋转蒸发仪. 5.4高速离心机:最大转速≤6000rpm. 5.5恒温水浴锅. 5.6滤膜过滤器:备孔径为0.45um 有机相. 6试样制备 万寿菊干花制品和含万寿菊制品按GB/T14699.1方法采样,按GB/T20195方法粉碎成全部能 通过0.425mm筛的试样,混匀,装人密闭容器中,避光,室温下保存. 7分析步骤 7.1试样处理 7.1.1碱水解 准确称取0.5g试样(准确到1mg) 置于25mL圆底烧瓶中,准确加人5mL异丙醇(4.2),轻轻摇 匀,滴加1.0mL氢氧化钠溶液(4.5)溶液,联接上蛇形冷凝管,于78℃士2℃水浴中加热水解30min. 7.1.2萃取 将上述水解液(7.1.1)在冷水中快速冷却到室...

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