ICS67.100.01 X16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2070-2011 牛初乳及其制品中免疫球蛋白gG的测定 分光光度法 Determination of immunoglobulin G in bovine colostrum and its products-Spectrophotometry 2011-09-01发布 2011-12-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2070-2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出. 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC274)归口. 本标准起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、东北农业大学. 本标准主要起草人:邵华、金茂俊、姜瞻梅、金芬、肖航、杨锚、王静、刘宁. I NY/T2070-2011 牛初乳及其制品中免疫球蛋白IgG的测定分光光度法 1范围 本标准规定了牛初乳及其制品中免疫球蛋白IgG的测定方法. 本标准适用于牛初乳及其制品中免疫球蛋白IgG的测定. 本方法检出限:0.2mg/mL. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB/T6682分析实验用水规格和试验方法 3原理 试样中可溶性抗原IgG与抗体形成可溶性免疫复合物,复合物在聚乙二醇作用下自液相析出,形成 微粒,使试液浊度发生变化,试液浊度与所含IgG抗原量成正比,在340nm测定免疫球蛋白IgG含量. 4试剂与材料 除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂.实验用水应符合GB/T6682规定的二级水 要求. 4.10.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取0.7g磷酸二氢钾(KH2PO4) 2.86g磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O) 0.20g氯化钾(KCI) 8.80g氯化钠(NaC1) 水溶解后调pH至7.4,用蒸馏水定容至1000mL 置4℃保存. 4.24%聚乙二醇缓冲液 取40g聚乙二醇,加磷酸盐缓冲液(4.1)定容至1000mL 置4℃保存. 4.3IgG标准贮备液 称取0.010gIgG标准品,精确至0.0001g 用磷酸盐缓冲液(4.1)溶解并定容至10.0mL 摇匀. 此标准贮备液质量浓度为1.0mg/mL 置一18℃保存备用. 4.4IgG标准系列溶液 取IgG标准贮备液,用4%聚乙二醇缓冲液稀释(4.2),配制浓度为0.20mg/mL、0.30mg/mL、 0.40mg/mL、0.50:mg/mL、0.60mg/mL、0.70mg/mL和0.80mg/mL的lgG标准系列溶液,临用时配制. 4.5抗IgG抗体贮备液 取10mg兔抗牛IgG抗体粉剂(效价≥10000)溶于2mL的磷酸盐缓冲液(4.1)中,每管分装成 100uL 置-18℃保存备用. 4.6抗IgG抗体稀释液 取100uL的抗体贮备液,加入4.9mL的聚乙二醇缓冲液(4.2),将抗体稀释50倍.临用时配制. 5仪器与设备 5.1紫外分光光度计,340m 配有微量比色皿. 5.2微量移液器. 1 ...