ICS65.020.20 B05 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2120-2012 香蕉无病毒种苗生产技术规范 Rules for production of virus-free banana plantlets 2012-02-21发布 2012-05-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2120-2012 .香蕉无病毒种苗生产技术规范 1范围 本标准规定了香蕉无病毒种苗生产技术和病毒检测对象及方法. 本标准适用于香蕉无病毒种苗的生产. 2、规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. NY/T357-2007香蕉组培苗 NY/T1475香蕉病虫害防治技术规范 NY5023无公害食品热带水果产地环境条件 3术语和定义 NY/T357界定的以及下列术语和定义适用于本文件. 3.1 . 香蕉无病毒种苗virus-free banana plantlets 通过植物组织培养技术获得的,经检测确认不带病毒的香蕉种苗. 3.2 .剑芽sword suckers 从香蕉母株球茎近地面位置长出的基部粗大但上部尖小的吸芽. 3.3 接种inoculation 程. 在无菌的条件下,对无菌的外植体或继代分化芽按要求进行切割,转移至新的培养基上培养的过 3.4 茎尖分生组织培养meristem-tip culture 术. 在无菌的条件下,切取香蕉吸芽或者分化芽含有茎尖生长点的部分,接种到培养基上进行培养的技 4检测对象 4.1香蕉花叶心腐病病原(黄瓜花叶病毒,Cucumber mosaic virus CMV). 4.2香蕉束顶病病原(香蕉束顶病毒,Banana bunchy top virus BBTV). 4.3香蕉线条(条纹)病病原[香蕉线条(条纹)病毒,Banana streak virus.BSV]. 5无病毒种苗生产技术 5.1接种前的准备 5.1.1组织培养器材 超净工作台、高压灭菌锅、光照培养箱、酒精灯、PH计、分析天平、微波炉(或电磁炉)接种盘、镊 1 NY/T2120-2012 子、解剖刀、培养容器和烧杯等. 5.1.2培养基配置 根据不同培养阶段所需要的培养基类型,按照附录A配制培养基:分装入培养容器, 5.1.3培养基和其他用品的消毒 将装有培养基的容器、接种用具用品等置于灭菌锅中,121℃高压灭菌约20min~30min. 5.2香蕉组培瓶(袋)苗培育 5.2.1外植体的采集 选择无病害(特别是无病毒病症状)的香蕉园为母本园.在母本园内选取品种特性典型、农艺性状 优良的健壮植株,逐株编号并按6.1的要求进行病毒检测.经检测确认无病毒的植株作为采芽母株,挖 取母株球茎上生长的健壮剑芽为外植体,标记品种名和编号. 5.2.2外植体消毒与接种 将采集的剑芽洗净,切成含茎尖生长点的材料,用75%酒精进行表面消毒,用3%~5%次氯酸钠消 毒15min~30min 然后用无菌水漂洗数次洗去消毒液. 以茎尖生长点为中心,视材料大小进行切割,接种至分化芽诱导培养基中,于适宜的温度和环境中 进行茎尖分生组织培养. 5.2.3继代培养 外植体初次培养的分化芽,按6.2的要求进行病毒检测.经检测确认无病毒的分化芽,接种至继代 培养基中,于适宜的温度和环境中通过继代培养不断增殖,获得大量分化芽.继代次数不宜超过10代. 5.2.4生根培养 将长至一定高度的分化芽,转接至装有生根培养基的容器中,于适宜的温度和环...