ICS65.120 B46 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2130-2012 饲料中烟酰胺的测定 高效液相色谱法 Determination of niacinamide in feeds- High-performance liquid chromatography 2012-02-21发布 2012-05-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T21302012 饲料中烟酰胺的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了饲料中烟酰胺含量的高效液相色谱检测方法. 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中烟酰胺的测定. 本标准的定量限为1mg/kg. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3原理 试样中的烟酰胺经提取液提取、离心后，取上清液过0.45μm滤膜，用高效液相色谱仪一紫外/二 极管阵列检测器检测，外标法定量. 4试剂和材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂和符合GB/T6682中的三级用水，色谱用水符合GB/T6682 中一级用水的规定. 4.1甲醇：色谱纯. 4.2异丙醇：色谱纯. 4.3辛烷磺酸钠：色谱纯. 4.40.1%辛烷磺酸钠(H=2.1):称取1g辛烷磺酸钠(4.3)加约800mL一级水溶解，用高氯酸调 pH=2.1 一级水定容至1000mL 混匀，过0.45um滤膜. 4.5样品提取液：800mL水中加人50mL乙腈，10mL冰乙酸混合，用水定容至1000mL 混匀. 4.6烟酰胺标准储备液：称取烟酰胺标准品（纯度≥98%）0.1g(精确至0.0001g) 置于100mL容量 瓶中，用提取液(4.5)溶解并定容，该溶液浓度为1mg/mL 置4℃冰箱中保存，有效期3个月. 4.7烟酰胺标准中间液：准确吸取5.0mL烟酰胺标准储备液(4.6)于100mL容量瓶中，用提取液 (4.5)稀释至100mL.该溶液浓度为50ug/mL 置4℃冰箱中保存，有效期1个月. 4.8烟酰胺标准工作液：准确移取10.0mL烟酰胺标准中间液(4.7)至100mL容量瓶中，用提取液 (4.5)稀释定容.该系列标准溶液浓度为5.0μg/mL.有效期1周. 4.90.45m有机微孔滤膜. 5仪器设备 实验室常用仪器、设备及以下设备. 1 NY/T2130—2012 5.1高效液相色谱仪：配备紫外或二极管阵列检测器. 5.2离心机：转速为5000r/min以上. 5.3超声波清洗器. 6试样采集及样品的制备 按GB/T14699.1的规定采集试样后，按GB/T20195的规定，选取具有代表性的样品，四分法缩 减分取200g 粉碎过0.45mm孔径(40目)的分析筛，混匀，装人磨口瓶中备用. 7分析步骤 7.1提取 准确称取适量试样（配合饲料5g 浓缩饲料2g 添加剂预混合饲料0.5g 精确到0.0001g) 置 100mL容量瓶中，加入提取液(4.5)约70mL 超声振荡10min 放置室温，用提取液(4.5)定容至刻度混 合均匀，然后在5000r/min离心机(5.2)上离心5min 移取上清液过0.45um滤膜(4.9)过滤，供高效 液相色谱测定或提取液适当稀释后测定. 7.2色谱参考条件 检测波长：267nm 色谱柱：Cs柱，5um 柱长150mm 内径4.6mm 或性能类似...
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