ICS65.020 B15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2291-2012 玉米细菌性枯萎病监测技术规范 Guidelines for quarantine surveillance of Pantoea stewartii subsp.stewartii(Smith)Mergaert et al. 2012-12-24发布 2013-03-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T2291-2012 玉米细菌性枯萎病监测技术规范 1范围 本标准规定了农业植物检疫中玉米细菌性枯萎病的疫情监测、室内检验、监测记录和报告的方法. 本标准适用于玉米细菌性枯萎病菌的疫情监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB15569农业植物调运检疫规程 GB/T23624玉米种子产地检疫规程 SN/T1375玉米细菌性枯萎病菌检疫鉴定方法 3原理 玉米细菌性枯萎病菌Pantoea stewartii subsp.stewartii(Smith)Mergaert et al.是危害玉米引 起枯萎病的一种病原细菌，病害可造成严重产量损失，为进境植物检疫性有害生物.属原核生物界 (Procaryotae) 薄壁菌门(Gracilicutes) 肠杆菌科(enterobacteriaceae) 泛菌属(Pantoea).异名： Erwinia stewartii(Smith)Dye. 玉米细菌性枯萎病菌的田间症状、生理生化反应、血清学反应和PCR反应等特征是其检测与鉴定 的重要依据. 4试剂与材料 氢氧化钾(KOH)、氯化钠(NaCI)、碘化钾(KI)、碘(I2)、草酸铵[(NH)2C2O]、甲基红指示剂、 α萘酚、乙醇、结晶紫、蔗糖、明胶、琼脂、牛肉浸膏、蛋白胨、酵母提取物等.检验中所需的其他试剂与培 养基，参见附录A. 试剂均为分析纯. 5仪器与用具 超净工作台、电子天平、显微镜、培养箱、摇床、高压灭菌锅、载玻片、盖玻片、解剖刀、注射器、培养 皿、试管和接种针等. 6疫情监测 6.1监测区域 重点监测玉米制繁种基地、引进境外玉米种子种植区、进口玉米加工和销售场所及其周边的玉米田 等高风险区域. 6.2监测时间 玉米整个生长期，重点监测苗期至吐丝期. 6.3监测方法 6.3.1踏查 1 NY/T2291-2012 在玉米不同生长期，选择有代表性的田块进行踏查，观察田间玉米有无细菌性枯萎病发病症状（参 见附录)，必要时可采用定点（定株）系统调查.同时调查种子来源、栽培管理及病虫害发生情况，做好 记录.发现有典型或疑似症状的植株，采样进行室内检验. 6.3.2系统监测 选择有代表性的田块，进行田间定点定期调查，每30d调查一次，采取5点取样或随机取样方法， 每点选取植物10株~20株进行调查，也可根据需要增减调查数量.疑似症状植株采样进行室内检验. 6.3.3产地检疫 玉米制繁种基地的疫情调查，按照GB/T23624的要求进行田间调查. 6.3.4调运检疫 按照GB15569的要求对调出的玉米种子进行调运检疫；对调入本地的玉米种子进行复检；并取样 进行室内检验. 7室内检验 7.1鉴定方法 7.1.1常规鉴定 7.1.1.1喷菌检查 切取田间采回的植株叶片病健交界处约10mm2~20mm2 平放在载玻片的水滴中，加盖玻片后，在 低倍显微镜下检查，观察有无喷菌现象. 7.1.1.2分离培养鉴定 选择田间采回的具有...
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