ICS67.080.20 CCS B 31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T4353-2023 蔬菜中甲基硒代半胱氨酸、硒代蛋 氨酸和硒代半胱氨酸的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of methylselenocysteine selenotmethionine and selenocysteine in vegetables by liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2023-04-11发布 2023-08-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T4353-2023 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出. 本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口. 本文件起草单位：江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所、江西省农学会、江西省农业科学 院土壤肥料与资源环境研究所. 本文件主要起草人：廖且根、张莉、向建军、万鹏、袁丽娟、沈思言、张大文、魏益华、罗林广、戴廷灿、邱 素艳、熊艳. NY/T4353-2023 蔬菜中甲基硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸和硒代半胱氨酸的测定 液相色谱-串联质谱法 1范围 本文件规定了蔬菜中甲基硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸和硒代半胱氨酸含量的液相色谱-串联质谱测定 方法. 本文件适用于蔬菜中甲基硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸和硒代半胱氨酸含量的测定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. 4原理 试样中硒代氨基酸用蛋白酶水解提取，经超滤管离心净化，用液相色谱-串联质谱仪检测，基质匹配标 准溶液校准，外标法定量. 5试剂和材料 5.1除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水. 5.2试剂 5.2.1甲醇(CHOH):色谱纯. 5.2.2甲酸(HCOOH):色谱纯. 5.2.3蛋白酶(protease XIV CAS号：9036-06-0)：酶活力≥3.5U/mg. 5.2.4抗坏血酸(CHO CAS号：50-81-7). 5.2.5三羟甲基氨基甲烷(C4H11NO3 CAS号：77-86-1). 5.2.6盐酸(HC1) 浓度为36%~38%. 5.3试剂配制 5.3.1蛋白酶溶液(5.0mg/mL):称取蛋白酶(5.2.3)250mg 用水稀释定容至50mL 摇匀，备用，现用 现配. 5.3.2抗坏血酸溶液(0.2mol/L):称取抗坏血酸(5.2.4)3.52g 用水稀释定容至100mL 摇匀，备用， 现用现配. 5.3.3三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HC)缓冲溶液(10.0mmol/L pH7.5):称取0.606g三羟甲基氨 基甲烷(5.2.5)溶于450mL水中，用盐酸(5.2.6)调节到pH7.5 加水稀释至500mL 摇匀，备用. 5.3.4甲酸溶液(0.1%)：量取甲酸(5.2.2)0.1mL 用水稀释定容至100mL 摇匀，备用. 5.4标准品 5.4.1甲基硒代半胱氨酸(C4HNO2S CAS号：26046-90-2)：纯度≥98%，...
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