附件2（略） 附件3（略） 附件4 说明书和标签 一、非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书和内包装标签 (一)非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书 兽用 【兽药名称】 通用名非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒 商品名无 英文名ELISA Kit for Detection of Antibodies Against African Swine Fever Virus 汉语拼音Feizhouzhuwen Bingdu ELISA Kangti Jiance Shijihe 【主要成分与含量】 (1)抗原包被板 2块(96孔/块) (2)阳性对照血清 1管(1.5ml/管) (3)阴性对照血清 1管(1.5ml/管) (4)兔抗猪酶标二抗 2瓶(12ml/瓶) (5)样品稀释液 1瓶(24ml/瓶) (6)20倍浓缩洗涤液 2瓶(50ml/瓶) (7)底物液A 1瓶(12ml/瓶) (8)底物液B 1瓶(12ml/瓶) (9)终止液 1瓶(12ml/瓶) (10)血清稀释板 2块(96孔/块) (11)说明书 1份 【作用与用途】用于检测猪血清中非洲猪瘟病毒抗体. 【用法与判定】 1用法 1.1样品制备取动物全血，待血液凝固后，以3500r/min离心10分钟，收集上清，也可采 集血液，待凝固后自然析出血清，要求血清清亮，无溶血. 1.2洗涤液配制使用前，将20倍浓缩洗涤液恢复至室温，如果有沉淀，37℃水浴使其溶 解，然后用去离子水稀释20倍备用. 1.3样品稀释在血清稀释板中按1：20的比例稀释待检血清(7ul血清133ul样品稀释液)， 阴、阳性对照血清已稀释，可直接使用. 1.4操作步骤 3 1.4.1加样取抗原包被板，将稀释好的待检血清、阴性对照和阳性对照加入到抗原包被板 中，100ul/孔.每份待检血清设1孔，阴性对照和阳性对照各设2孔，加样过程时间跨度应尽量短. 酶标板上对照血清和待检血清添加模式如下所示 1 23456 7 8 9 10 1112 A SI B S2 S3 D S4 E P F P G N H N 注：S1、S2、S3、S4等表示加各待检血清；P:表示加阳性对照血清；N:表示加阴性对照 血清. 1.4.2温育震荡混匀（勿溢出），置37℃温箱内孵育30分钟. 1.4.3洗板弃去反应液，每孔加入洗涤液300l 浸泡15秒，甩弃洗涤液.连续洗板5次 后拍干. 1.4.4加酶各孔加入兔抗猪酶标二抗100ul. 1.4.5温育置37℃温箱内孵育30分钟. 1.4.6洗板弃去反应液，每孔加入洗涤液300l 浸泡15秒，甩弃洗涤液.连续洗板5次 后拍干. 1.4.7显色各孔加入1001底物工作液（将底物液A和底物液B等量混合即为底物工作液， 现用现配)，震荡混匀，置37℃温箱内避光反应15分钟. 1.4.8终止各孔加入显色终止液50ul 振荡混匀终止反应，15分钟内测定结果. 2判定在酶标仪上测各孔OD45mm值. 2.1试验成立的条件是：阳性对照孔0D450mm值应介于0.9~2.0之间，阴性对照孔0D450nm 值均应<0.15； 2.2阳性临界值(Cut-off值)=阳性对照孔OD45onm均值×0.17； 2.3样品0D450nm值≥阳性对照孔0D450nm均值×0.17，判为阳性；样品0D45onm值<阳性对照 孔0D45mm均值×0.15，判为阴性；两者之间判为可疑. 【注意事项】(1)将试剂盒从冷藏环境中取出，置室温平衡30分钟后使用，液体试剂用 前混匀.洗涤液若有结晶析出，轻微加热溶解后不影响使用.为保...
农业农村部公告第682号 那西肽残留检测方法标准.pdf
